目的 探讨系统性硬化病(SS)患者皮损成纤维细胞单克隆Ⅲ型前胶原基因的转录特性及丹参对其的调控.方法 构建含有人Ⅲ型前胶原α1链(COL3A1)基因不同长度转录调控序列的重组质粒,利用瞬时转染、双荧光素酶报告基因技术检测其在SS患者皮损和正常人皮肤胶原合成异质性成纤维细胞克隆中的活性,并筛选出COL3A1近端转录调控靶序列.再通过转染、报告基因测活技术测定丹参注射液及其主要单体(丹参素钠、丹酚酸B、原儿茶醛和丹参酮ⅡA)对SS和正常人胶原合成异质性成纤维细胞克隆COL3A1近端启动区活性的调控.应用SPSS15.0软件进行统计学分析,基因转染、测活实验中,phCOLH30.1活性的比较采用t检验;丹参干预实验中,phCOLH30.1活性的比较采用双因素方差分析,若两因素存在交互作用,再进行单因素方差分析;若无交互作用,去除交互项,检验主效应.结果 6个COL3A1转录调控序列中,近端启动区-96 bp～+16 bp在SS组和正常对照组不同成纤维细胞克隆具有最高或较高的活性,且其活性与克隆的胶原合成能力呈正相关.丹参注射液下调COL3A1近端启动区在SS组(阴性对照组高、低胶原合成克隆COL3A1近端启动区相对活性分别为3.879±0.309和2.150±0.262,丹参注射液组分别为2.261±0.619和1.462±0.291,与阴性对照组相比,P均＜0.01)和正常对照
作者：朱鹭冰；高地；李明
来源：中华皮肤科杂志 2012 年 45卷 4期
