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目的 研究自噬促进剂西罗莫司对反复亚毒性中波紫外线诱导提早衰老(UVB-SIPS)的影响.方法 人皮肤成纤维细胞分为6组,对照组、10 mg/L西罗莫司组、UVB组、UVB+ 0.1 mg/L西罗莫司组、UVB+1.0 mg/L西罗莫司组、UVB+ 10.0 mg/L西罗莫司组.UVB照射剂量10 mJ/cm2每日1次共5次,对照组用含1%小牛血清的DMEM培养基培养5d;西罗莫司组在每次换液后加入西罗莫司;西罗莫司+UVB组在每次照射UVB后加入西罗莫司过夜.CCK-8检测细胞活性,β半乳糖苷酶化学染色法检测衰老细胞,吖啶橙染色检测细胞自噬,Western印迹检测衰老相关分子信号p53及自噬相关蛋白LC3-B及beclin 1的表达水平.数据用SPSS 16.0软件分析,多组间均数行单因素方差分析,结合t检验和LSD法.结果 UVB+0.1、1.0、10 mg/L西罗莫司组的细胞活性(A450值)分别为0.27±0.02、0.36±0.04、0.39±0.04,呈浓度依赖性升高,与UVB组(0.26±0.01)比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);3个组β半乳糖苷酶染色阳性细胞分别为92.50%±0.34%、42.40%±0.53%、6.20%±0.39%,与UVB组(95.10%±0.32%)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);3组吖啶橙染色荧光定量分别为36.43±0.24、45.25±0.33、48.69±0.37,与UVB组(33.99±0.32)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);3组p53、

作者:方晓波;周炳荣;骆丹;郭泽;尹慧彬;胡燕燕

来源:中华皮肤科杂志 2013 年 46卷 8期

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作者:
方晓波;周炳荣;骆丹;郭泽;尹慧彬;胡燕燕
来源:
中华皮肤科杂志 2013 年 46卷 8期
标签:
成纤维细胞 细胞衰老 紫外线 西罗莫司 自噬 Fibroblasts Cell aging Ultraviolet rays Sirolimus Autophagy
目的 研究自噬促进剂西罗莫司对反复亚毒性中波紫外线诱导提早衰老(UVB-SIPS)的影响.方法 人皮肤成纤维细胞分为6组,对照组、10 mg/L西罗莫司组、UVB组、UVB+ 0.1 mg/L西罗莫司组、UVB+1.0 mg/L西罗莫司组、UVB+ 10.0 mg/L西罗莫司组.UVB照射剂量10 mJ/cm2每日1次共5次,对照组用含1%小牛血清的DMEM培养基培养5d;西罗莫司组在每次换液后加入西罗莫司;西罗莫司+UVB组在每次照射UVB后加入西罗莫司过夜.CCK-8检测细胞活性,β半乳糖苷酶化学染色法检测衰老细胞,吖啶橙染色检测细胞自噬,Western印迹检测衰老相关分子信号p53及自噬相关蛋白LC3-B及beclin 1的表达水平.数据用SPSS 16.0软件分析,多组间均数行单因素方差分析,结合t检验和LSD法.结果 UVB+0.1、1.0、10 mg/L西罗莫司组的细胞活性(A450值)分别为0.27±0.02、0.36±0.04、0.39±0.04,呈浓度依赖性升高,与UVB组(0.26±0.01)比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);3个组β半乳糖苷酶染色阳性细胞分别为92.50%±0.34%、42.40%±0.53%、6.20%±0.39%,与UVB组(95.10%±0.32%)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);3组吖啶橙染色荧光定量分别为36.43±0.24、45.25±0.33、48.69±0.37,与UVB组(33.99±0.32)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);3组p53、