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目的 探讨尘螨变应原rDer p1在体外对角质形成细胞表达胸腺基质淋巴生成素(TSLP)的影响.方法 体外培养人角质形成细胞株HaCaT细胞,予以0.1、1和10 mg/L尘螨变应原rDer p1与蛋白酶活化受体2(PAR2)特异性激动剂SLGIKV(500 μmol/L)和拮抗剂VKGILS(500μmol/L)共培养,以无血清培养基为空白对照.用ELISA法和荧光定量PCR法检测各实验组和对照组TSLP蛋白及mRNA表达水平;通过激光共聚焦显微镜检测细胞内钙流变化分析rDer p1诱导HaCaT细胞产生TSLP和PAR2受体活化的关系.结果 1 mg/L和10 mg/L rDer p1组培养12 h上清中TSLP水平分别为(155.5±5.9) ng/L和(228.8±28.7) ng/L,显著高于空白对照组(54.3±13.9 ng/L,P< 0.01),TSLP表达水平随rDer p1浓度增加而升高.SLGIKV组TSLP表达[(166.2±8.8) ng/L]也显著高于空白对照组(P<0.01).10mg/LrDer p1组和SLGIKV组TSLP mRNA相对表达量在8h最高,分别为(3.28±0.27)倍和(2.15±0.26)倍,与4h和24 h相比差异有统计学意义(P<0.01).SLGIKV可引起HaCaT细胞钙内流增加;10 mg/L rDer p1也可引起HaCaT细胞钙内流增加,经过PAR2受体特异性阻断剂VKGILS(500 μmol/L)处理后再给予rDer p1刺激,细胞内钙内流峰值明显降低.结论 尘螨变应原rDer p1能够通过部分活化HaCaT细胞表面的PAR2受

作者:倪春雅;高露娟;陈连军;窦侠

来源:中华皮肤科杂志 2014 年 47卷 2期

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作者:
倪春雅;高露娟;陈连军;窦侠
来源:
中华皮肤科杂志 2014 年 47卷 2期
标签:
皮炎,特应性 屋尘螨 角蛋白细胞 胸腺基质淋巴生成素 Dermatitis,atopic Dermatophagoides pteronyssinus Keratinocytes Thymic stromal lymphopoietin
目的 探讨尘螨变应原rDer p1在体外对角质形成细胞表达胸腺基质淋巴生成素(TSLP)的影响.方法 体外培养人角质形成细胞株HaCaT细胞,予以0.1、1和10 mg/L尘螨变应原rDer p1与蛋白酶活化受体2(PAR2)特异性激动剂SLGIKV(500 μmol/L)和拮抗剂VKGILS(500μmol/L)共培养,以无血清培养基为空白对照.用ELISA法和荧光定量PCR法检测各实验组和对照组TSLP蛋白及mRNA表达水平;通过激光共聚焦显微镜检测细胞内钙流变化分析rDer p1诱导HaCaT细胞产生TSLP和PAR2受体活化的关系.结果 1 mg/L和10 mg/L rDer p1组培养12 h上清中TSLP水平分别为(155.5±5.9) ng/L和(228.8±28.7) ng/L,显著高于空白对照组(54.3±13.9 ng/L,P< 0.01),TSLP表达水平随rDer p1浓度增加而升高.SLGIKV组TSLP表达[(166.2±8.8) ng/L]也显著高于空白对照组(P<0.01).10mg/LrDer p1组和SLGIKV组TSLP mRNA相对表达量在8h最高,分别为(3.28±0.27)倍和(2.15±0.26)倍,与4h和24 h相比差异有统计学意义(P<0.01).SLGIKV可引起HaCaT细胞钙内流增加;10 mg/L rDer p1也可引起HaCaT细胞钙内流增加,经过PAR2受体特异性阻断剂VKGILS(500 μmol/L)处理后再给予rDer p1刺激,细胞内钙内流峰值明显降低.结论 尘螨变应原rDer p1能够通过部分活化HaCaT细胞表面的PAR2受