目的 探讨RNA干扰技术下调PLK1基因对恶性黑素瘤细胞侵袭的影响和可能机制.方法 用PLK1小干扰核糖核酸分子(siRNA)转染人恶性黑素瘤A375细胞后,分别用实时定量PCR和Western印迹法检测PLK1 mRNA和蛋白表达,Transwell方法检测细胞侵袭能力,以平板集落形成方法了解癌细胞集落形成情况,分别用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测癌细胞失巢凋亡情况.结果 恶性黑素瘤A375细胞经PLK1 siRNA转染后,PLK1 mRNA和蛋白表达明显下调;siRNA转染组癌细胞生长明显受到抑制.与空白对照组和脂质体对照组比较,siRNA细胞转染组侵袭性明显下降.失巢凋亡检测发现,琼脂糖凝胶电泳出现明显的梯度图谱.TUNEL结果显示,PLK1 siRNA可诱导恶性黑素瘤A375细胞凋亡,siRNA细胞转染组较空白对照组和脂质体对照组凋亡指数明显升高[3.86％±0.35％(3.125 nmol/L siRNA组),7.35％±0.36％(6.250 nmol/LsiRNA组),17.56％±0.38％(12.500 nmol/L siRNA组)比1.15％±0.25％和1.18％±0.22％),均P＜ 0.01].结论 PLK1 siRNA可抑制恶性黑素瘤细胞的侵袭,其机制可能与诱导失巢凋亡有关.
作者：丁克云；徐娟；满昌峰；范钰
来源：中华皮肤科杂志 2014 年 47卷 6期
