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目的 探讨黑素瘤细胞A375细胞外信号调节激酶(ERK)通路与核因子κB(NF-κB)信号转导通路的交互作用.方法 将培养的A375细胞分为对照组、选择性ERK信号通路抑制剂U0126(10 μmol/L、5 μmol/L)处理组和选择性NF-κB通路抑制剂BMS-345541(10 μmol/L、5μmol/L)处理组,分别提取蛋白质和mRNA,用Western印迹、RT-PCR观察U0126抑制ERK通路后,NF-κB P65、p-IκBα蛋白及NF-κB P65mRNA的表达,观察BMS-345541抑制NF-κB通路后ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达.结果 应用10 μmol/L、5μmol/L U0126抑制ERK通路后,胞核NF-κB P65蛋白表达(分别为0.60±0.04、0.56±0.06)均较对照组(1.54±0.15)减少(P<0.01),其表达量与药物浓度无显著相关性(P> 0.01);p-IκBα蛋白的表达(0.90±0.05、0.70±0.02)均较对照组(0.61±0.03)增加(P<0.01),两药物浓度组之间的表达量差异有统计学意义(P< 0.01);NF-κB P65 mRNA的表达(0.79±0.05,0.75±0.04)均较对照组(0.86±0.05)减少(P<0.01).应用10 μmol/L BMS-345541抑制NF-κB通路后,ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达(0.73±0.07、0.75±0.09、1.51±0.02)较对照组减少(P<0.01),BMS-345541浓度为5μmol/L时,ERK1/2 、p-ERK 1/2蛋白和ERK1 mRNA的表达(0.94±0.

作者:秦绪艳;臧运书;潘敏;袁梦姝;郁博;吴惠惠

来源:中华皮肤科杂志 2014 年 47卷 8期

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作者:
秦绪艳;臧运书;潘敏;袁梦姝;郁博;吴惠惠
来源:
中华皮肤科杂志 2014 年 47卷 8期
标签:
黑色素瘤 NF-κB 细胞外信号调节MAP激酶类 信号转导 Melanoma NF-kappa B Extracellular signal-regulated MAP kinase Signal transducting
目的 探讨黑素瘤细胞A375细胞外信号调节激酶(ERK)通路与核因子κB(NF-κB)信号转导通路的交互作用.方法 将培养的A375细胞分为对照组、选择性ERK信号通路抑制剂U0126(10 μmol/L、5 μmol/L)处理组和选择性NF-κB通路抑制剂BMS-345541(10 μmol/L、5μmol/L)处理组,分别提取蛋白质和mRNA,用Western印迹、RT-PCR观察U0126抑制ERK通路后,NF-κB P65、p-IκBα蛋白及NF-κB P65mRNA的表达,观察BMS-345541抑制NF-κB通路后ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达.结果 应用10 μmol/L、5μmol/L U0126抑制ERK通路后,胞核NF-κB P65蛋白表达(分别为0.60±0.04、0.56±0.06)均较对照组(1.54±0.15)减少(P<0.01),其表达量与药物浓度无显著相关性(P> 0.01);p-IκBα蛋白的表达(0.90±0.05、0.70±0.02)均较对照组(0.61±0.03)增加(P<0.01),两药物浓度组之间的表达量差异有统计学意义(P< 0.01);NF-κB P65 mRNA的表达(0.79±0.05,0.75±0.04)均较对照组(0.86±0.05)减少(P<0.01).应用10 μmol/L BMS-345541抑制NF-κB通路后,ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达(0.73±0.07、0.75±0.09、1.51±0.02)较对照组减少(P<0.01),BMS-345541浓度为5μmol/L时,ERK1/2 、p-ERK 1/2蛋白和ERK1 mRNA的表达(0.94±0.