目的 研究miR-145对人角质形成细胞系HaCaT细胞增殖、细胞周期及凋亡的调控效应.方法 化学合成miR-145的模拟物,采用瞬时转染的方法过表达miR-145.采用实时PCR方法检测miR-145的表达.MTS方法检测过表达miR-145对HaCaT细胞增殖的影响.流式细胞仪分析过表达miR-145对细胞周期及凋亡的影响.采用荧光素酶实验,实时PCR和Western印迹鉴定NRAS是否为miR-145的靶基因.结果 与阴性对照(NC)mimics转染组相比,miR-145 mimics转染组miR-145表达水平上调(85.00±1.21)倍,两组差异有统计学意义(t=115.90,P＜ 0.001).转染miR-145 mimics有抑制HaCaT细胞的增殖作用(F=8.76,P=0.008);转染后的时间因素(24、48、72、96 h)对细胞有影响(F=17.85,P＜ 0.001),转染mimics和培养时间之间不存在交互作用(F=1.21,P=0.18).与NC mimics转染组相比,miR-145 mimics转染组的早期凋亡、晚期凋亡细胞比例均明显增加,差异有统计学意义(18.9％±4.1％比4.3％±1.2％,t=7.126,P＜0.01;9.3％±2.3％比3.6％±1.6％,f=12.38,P＜ 0.01).与NC mimics转染组相比,miR-145 mimics转染组HaCaT细胞的G2及S期细胞比例均明显降低,差异均有统计学意义(6.26％±1.2％比19.36％±3.45％,t=7.610,P=0.017;7.91％±1.3％比18.56％±5.23％,t=7.230,P=0.019),

作者：李璟蓉；王建琴；方锐华；曾仁山；莫金雪；郭云龙；贾淑青

来源：中华皮肤科杂志 2015 年 48卷 6期