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目的 探讨精胺氧化酶抑制剂SI-4650对人恶性黑素瘤A375细胞增殖的影响及其机制.方法 取0、10、20、40、80、160μmol/L SI-4650作用A375细胞24、48、72 h,MTT法分析SI-4650对细胞增殖抑制率的影响.根据增殖活性,筛选出浓度分别为0(对照组)、40、80μmol/L的SI-4650处理A375细胞48 h,化学发光法检测细胞内精胺氧化酶活性;高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内多胺含量;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡;Western印迹分析凋亡标志蛋白Bax、c-PARP,凋亡抑制蛋白Bcl-2和自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达.多组均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用SNK-q检验.结果 不同浓度、不同处理时间的SI-4650对A375细胞增殖抑制率差异均有统计学意义(F=977.23、5.16,均P<0.001).对照组、40μmol/L组、80μmol/L组A375细胞精胺氧化酶活性(F=242.58,P<0.001)、精脒和总多胺含量(F=338.02、2931.07,P<0.001)、S期细胞比例(F=31.66,P<0.001)、凋亡细胞比例(F=100.68,P<0.001)、凋亡相关蛋白Bax、c-PARP、Bcl-2水平(F=35.51、730.11、27.54,P<0.001)、自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ水平(F=35.87、425.04,P<0.001)差异均有统计学意义;40μmol/L组、80μmol/L组精胺氧化酶活性(发光强度61432.85±2620.92、43337.35±1221.25)

作者:周游;王艳林;曹春雨;孙丽丹;杨建林

来源:中华皮肤科杂志 2019 年 52卷 10期

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作者:
周游;王艳林;曹春雨;孙丽丹;杨建林
来源:
中华皮肤科杂志 2019 年 52卷 10期
标签:
黑色素瘤 精胺 精脒 细胞增殖 细胞凋亡 自噬 细胞系,肿瘤 精胺氧化酶抑制剂 Melanoma Spermine Spermidine Cell proliferation Apoptosis Autophagy Cell line tumor Spermine oxidase inhibitor
目的 探讨精胺氧化酶抑制剂SI-4650对人恶性黑素瘤A375细胞增殖的影响及其机制.方法 取0、10、20、40、80、160μmol/L SI-4650作用A375细胞24、48、72 h,MTT法分析SI-4650对细胞增殖抑制率的影响.根据增殖活性,筛选出浓度分别为0(对照组)、40、80μmol/L的SI-4650处理A375细胞48 h,化学发光法检测细胞内精胺氧化酶活性;高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内多胺含量;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡;Western印迹分析凋亡标志蛋白Bax、c-PARP,凋亡抑制蛋白Bcl-2和自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达.多组均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用SNK-q检验.结果 不同浓度、不同处理时间的SI-4650对A375细胞增殖抑制率差异均有统计学意义(F=977.23、5.16,均P<0.001).对照组、40μmol/L组、80μmol/L组A375细胞精胺氧化酶活性(F=242.58,P<0.001)、精脒和总多胺含量(F=338.02、2931.07,P<0.001)、S期细胞比例(F=31.66,P<0.001)、凋亡细胞比例(F=100.68,P<0.001)、凋亡相关蛋白Bax、c-PARP、Bcl-2水平(F=35.51、730.11、27.54,P<0.001)、自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ水平(F=35.87、425.04,P<0.001)差异均有统计学意义;40μmol/L组、80μmol/L组精胺氧化酶活性(发光强度61432.85±2620.92、43337.35±1221.25)