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目的:初步探讨Fam114A1对黑素细胞生物学功能的影响。方法:以黑素瘤细胞A375为工具细胞株,通过慢病毒转染的方式构建稳定过表达和抑制Fam114A1蛋白的细胞株,即过表达组和表达抑制组,以转染空载慢病毒的A375细胞作为对照组。实时荧光定量PCR检测Fam114A1对黑素合成相关基因酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)、前黑素小体蛋白(PMEL)、小眼畸形相关转录因子(MITF)和多巴色素异构酶(DCT)mRNA表达的影响,Western印迹法检测TYR、MITF蛋白的表达,MTT法、Transwell迁移和黏附实验分别检测Fam114A1对A375细胞增殖活性、迁移细胞数及黏附能力的影响。统计分析采用单因素方差分析和Dunnett- t检验。 结果:荧光显微镜观察慢病毒转染效率均在90

作者:周妙妮;林福全;吴辛刚;许爱娥

来源:中华皮肤科杂志 2020 年 53卷 9期

知识库介绍

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作者:
周妙妮;林福全;吴辛刚;许爱娥
来源:
中华皮肤科杂志 2020 年 53卷 9期
标签:
黑素细胞 细胞增殖 细胞迁移分析 细胞黏附 Fam114A1 A375细胞 黑素合成 Melanocytes Cell proliferation Cell migration assays Cell adhesion Fam114A1 A375 cells Melanin synthesis
目的:初步探讨Fam114A1对黑素细胞生物学功能的影响。方法:以黑素瘤细胞A375为工具细胞株,通过慢病毒转染的方式构建稳定过表达和抑制Fam114A1蛋白的细胞株,即过表达组和表达抑制组,以转染空载慢病毒的A375细胞作为对照组。实时荧光定量PCR检测Fam114A1对黑素合成相关基因酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)、前黑素小体蛋白(PMEL)、小眼畸形相关转录因子(MITF)和多巴色素异构酶(DCT)mRNA表达的影响,Western印迹法检测TYR、MITF蛋白的表达,MTT法、Transwell迁移和黏附实验分别检测Fam114A1对A375细胞增殖活性、迁移细胞数及黏附能力的影响。统计分析采用单因素方差分析和Dunnett- t检验。 结果:荧光显微镜观察慢病毒转染效率均在90