目的:探讨表皮生长因子受体（EGFR）shRNA联合西罗莫司对人皮肤鳞状细胞癌Colo-16细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法:Colo-16细胞分为5组：正常细胞组（常规培养+磷酸盐缓冲液）、阴性对照组（转染shRNA-NC质粒+磷酸盐缓冲液）、西罗莫司组（常规培养+西罗莫司）、EGFR shRNA组（转染EGFR shRNA质粒）、联合组（转染EGFR shRNA质粒+西罗莫司）。采用MTT法检测各组24 ~ 96 h各时间点细胞增殖活性，流式细胞仪分析处理48 h后各组细胞凋亡情况。RT-PCR检测Bcl-2、Bax mRNA的表达，Western印迹法检测凋亡相关蛋白cleaved caspase3、cleaved caspase9、Bcl-2、Bax、细胞增殖相关蛋白p-mTOR、p-AKT、p-P70S6K及细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表达。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两多重比较采用SNK- q检验。 结果:MTT检测显示，24 ~ 96 h西罗莫司组、EGFR shRNA组及联合组Colo-16细胞增殖活性均显著低于正常细胞组（均 P < 0.05），且联合组细胞增殖活性显著低于西罗莫司组和EGFR shRNA组（均 P < 0.001），正常细胞组与阴性对照组各时间点细胞增殖活性差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。流式细胞实验结果显示，西罗莫司组、EGFR shRNA组和联合组细胞凋亡率分别为9.52

作者：王慧；刘董；田芳；魏志平

来源：中华皮肤科杂志 2022 年 55卷 2期