目的:探讨白念珠菌对小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）焦亡的影响。方法:通过活细胞工作站实时观察白念珠菌[感染复数（MOI）= 50，下同]体外诱导BMDM后是否发生焦亡；将BMDM分为对照组、白念珠菌组，分别用磷酸盐缓冲液和白念珠菌酵母诱导BMDM 6 h，实时荧光定量PCR检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、白细胞介素1β（IL-1β）、IL-18 mRNA表达水平，Western印迹法检测NLRP3、胱天蛋白酶1（Caspase-1）、Gasdermin D（GSDMD）的表达及剪切水平。用白念珠菌诱导BMDM不同时间（0、10、15、20及25 h）后，酶联免疫吸附试验检测IL-1β、IL-18分泌水平。白念珠菌体外诱导野生型（WT）BMDM及GSDMD敲除（KO）BMDM 15 min，采用流式细胞仪比较WT、GSDMD KO BMDM对白念珠菌的吞噬率；诱导6 h后，采用流式细胞仪及乳酸脱氢酶（LDH）释放法分别检测WT、GSDMD KO BMDM的死亡率。分别设置空白对照组、对照组、样品最大酶活性对照孔组、IL-1β组、白念珠菌组、IL-1β +白念珠菌组，用IL-1β和/或白念珠菌酵母诱导BMDM后用LDH释放法分析WT及GSDMD KO BMDM死亡率。采用非配对
t检验、Kruskal-Wallis检验、方差分析等统计学方法进行统计分析。
结果:白念珠菌体外诱导BMDM后细胞可出现气球样变及出泡现
作者：杨璐；段志敏；何艳艳；王嘉宁；陈青；陈旭；李岷
来源：中华皮肤科杂志 2023 年 56卷 4期
