目的:探讨犀地凉血方对HaCaT细胞LncRNA NEAT1/miR-485-5p/STAT3调控网络及细胞增殖、凋亡的影响。方法:以IL-17诱导的HaCaT细胞为研究对象,通过qPCR、Western印迹法检测LncRNA NEAT1、miR-485-5p、STAT3 mRNA和蛋白在HaCaT细胞和正常人表皮角质形成细胞(NHEK细胞)中的表达。采用荧光原位杂交技术(FISH)观察LncRNA NEAT1、miR-485-5p在HaCaT细胞中的表达;采用双萤光素酶报告基因实验验证LncRNA NEAT1、miR-485-5p、STAT3之间的靶向调控关系。犀地凉血方煎煮取汁给予大鼠灌胃后采集含药血清,以含药血清干预和/或LncRNA-NEAT1过表达载体转染HaCaT细胞,将HaCaT细胞分对照组、过表达LncRNA NEAT1组、犀地凉血方组、犀地凉血方+过表达LncRNA NEAT1组,采用qPCR、Western印迹法、流式细胞仪、CCK8等实验技术分别检测LncRNA NEAT1、miR-485-5p、STAT3表达及细胞增殖、凋亡情况。采用独立样本
t检验、单因素方差分析、LSD-
t检验进行统计学分析。
结果:IL-17诱导的HaCaT细胞组LncRNA NEAT1、STAT3 mRNA相对表达水平(1.84 ± 0.21、2.20 ± 0.24)高于NHEK细胞组(1.00 ± 0.11、1.00 ± 0.11,均
P < 0.05),miR-485-5p相对表达水平(0.32 ± 0.04)低于NHEK细胞组(1.00 ± 0.
作者:唐志铭;荆梦晴;陆鹭;单霄;张翠侠;张晓宇;孟飒
来源:中华皮肤科杂志 2023 年 56卷 7期