目的:研究成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）与人乳头瘤病毒2型（HPV2）E2对人角质形成细胞系HaCaT和正常人表皮角质形成细胞系NHEK分化的调控效应。方法:在HaCaT和NHEK细胞中，采用慢病毒转染法构建HPV2 E2稳转细胞系（HPV2 E2转染组），采用质粒转染法构建过表达FGFR3或FGFR3突变体K650E的细胞，即FGFR3-WT转染组、FGFR3-K650E转染组，均以转染空载体的细胞为空载体对照组。采用实时荧光定量PCR检测HPV2 E2 mRNA表达，Western印迹法检测HPV2 E2、FGFR3及角质形成细胞分化标志性分子兜甲蛋白、聚丝蛋白、内披蛋白的表达。激光共聚焦显微镜观察HPV2 E2与FGFR3的细胞空间定位。两组数据比较采用独立样本
t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用Dunnett-
t检验。
结果:成功构建HPV2 E2稳转细胞系，HaCaT和NHEK细胞中HPV2 E2转染组HPV2 E2 FLAG蛋白表达量均显著高于空载体对照组（
t值分别为13.71和25.91，均
P < 0.001）；在HaCaT和NHEK细胞中成功过表达FGFR3-WT和FGFR3-K650E，两细胞系FGFR3-WT转染组和FGFR3-K650E转染组FGFR3蛋白表达均显著高于空载体对照组（
F值分别为473.90和579.90，均
P < 0.001）。HaCaT及NHEK细胞中，HPV2 E2转染组细
作者：郭清清；齐家跃；解方；李承新
来源：中华皮肤科杂志 2023 年 56卷 11期
