目的 观察自噬和凋亡在胰岛素对人食管鳞癌细胞化疗增敏中的作用.方法 以140 mg/L顺铂作用于食管鳞癌EC9706细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,探寻活细胞数量达到平台期的时间T1(24 h),加入10 mU/ml胰岛素继续培养,6h后活细胞数再次达到T2平台期.分别收集T1、T2平台期细胞,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和单丹磺酰戊二胺(MDC)染色后,荧光显微镜下定性观察荧光;流式细胞术定量检测细胞凋亡、测定MDC荧光强度;Westernblot检测自噬相关蛋白Beclin-1的表达.结果 (1)T1平台期细胞凋亡率为(32.6±4.3)%,低于T2平台期的(47.5±5.6)%,差异有统计学意义(P<0.05),但T1平台期细胞MDC平均荧光强度为104.9±13.2,明显高于T2平台期的82.6±10.3,差异有统计学意义(P<0.05).(2)加入胰岛素后Beclin-1的表达显著下调,对照组、T1平台期、T2平台期的相对灰度值分别为0.151±0.053、0.657±0.050、0.453±0.032,任意两组之间差异均有统计学意义(P<0.01).结论 通过抑制自噬,增加细胞凋亡,胰岛素提高了食管鳞癌细胞对顺铂的敏感性.
作者:温丰标;杨洋;刘东雷;吴恺;齐宇;赵佳;赵松
来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 12期