目的 观察过表达细胞周期蛋白依赖性激酶2A(CDKN2A)基因对食管鳞癌细胞株TE-13增殖、迁移能力的影响.方法 采用脂质体转染法将已构建好的PcDNA3.1_CDNK2A及空载体质粒PcDNA3.1_neo分别转染人食管癌细胞TE-13,分为实验组(PcDNA3.1_CDNK2A_ TE-13),阴性对照组(PcDNA3.1_neo-TE-13)及空白对照组(只添加转染试剂).采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染前后CDKN2A mRNA表达水平;应用噻唑蓝(MTT)法检测转染后细胞的增殖能力;采用Transwell实验检测细胞的迁移能力.结果 实验组、阴性对照组及空白对照组CDNK2A mRNA相对表达水平分别为0.45 ±0.10、0.48±0.12及2.12±0.24,实验组显著高于阴性对照和空白对照组(F=200.500,P=0.000).实验组、阴性对照组及空白对照组吸光度值分别为0.71 ±0.08、1.05±0.09和0.97±0.08,差异有统计学意义(F=27.220,P=0.000).Tanswell结果显示实验组、阴性对照组及空白对照组穿过生物膜细胞分别为(156.8±23.1)、(166.9 ±28.4)和(162.1 ±30.3)个,差异无统计学意义(F=0.200,p=0.818).结论 CDKN2A基因表达能够显著抑制食管癌细胞的增殖,但对其迁移能力无明显影响.
作者:魏伦收;姚坤厚;索智敏;苏红
来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 5期