目的:探讨间充质干细胞来源外泌体(MSC-EVs)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A的生物学作用及其机制。方法:将MH7A细胞系分为对照组和外泌体组。对MSC的培养上清液采用差速离心法收集MSC-EVs,对照组采用常规方法进行培养,外泌体组则将MH7A细胞与MSC-EVs共同孵育24 h,2组细胞达到收样条件后通过免疫荧光实验、Transwell实验、酶联免疫吸附实验(ELISA)及实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)等实验观察MSC-EVs对MH7A细胞株生物学行为的影响及其分子机制,各观察指标采用独立样本
t检验进行统计学分析。
结果:粒径分析检测及透射电镜结果表明,通过差速离心法成功提取了MSC-EVs,随后免疫荧光证实MSC-EVs能被MH7A细胞株所摄取。细胞增殖结果表明,MSC-EVs组细胞核增殖抗原(Ki-67)荧光灰度值(4.01±1.01)明显低于对照组(11.67±1.53),差异有统计学意义(
t=-7.273,
P<0.01)。Transwell结果显示,MSC-EVs组侵袭能力(70.00±5.29)显著低于对照组(110.67±6.11),差异有统计学意义(
t=-8.714,
P<0.01)。ELISA结果表明,MSC-EVs组的炎性因子低于对照组,差异有统计学意义[肿瘤坏死因子-α(TNF-α):
t=-5.345,
P<0.01;白细胞介素(IL)-1β:
作者:包德明;宋瑞鹏;刘鸣;宋辉;赵世新;王丹
来源:中华实验外科杂志 2024 年 41卷 2期