目的:观察利拉鲁肽在人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)增殖、凋亡中的作用,进一步探讨其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路的关系。方法取生长于血清低糖杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM/F12)中的HUC-MSCs以不同浓度的利拉鲁肽(分别为1.0′10-9、10-8、10-7 mol/L)以及空白对照分别干预24、48 h,细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)检测HUC-MSCs增殖力,流式细胞术检测细胞凋亡率,探讨利拉鲁肽的最佳作用浓度及时间,进一步添加20μmol/L的PI3K特异性抑制剂LY294002,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中环磷酸腺苷(cAMP)的浓度,Western blotting检测PI3K/AKT信号通路中磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)蛋白的表达水平。两组间数据比较采用独立样本t检验,多组间比较采用ANOVA方差分析。结果利拉鲁肽作用后,分别与1.0′10-9(0.52±0.10)、10-8 mol/L(0.68±0.07)组及对照组(0.44±0.09)比较,干预24 h后1.0′10-7 mol/L利拉鲁肽组(0.78±0.04)HUC-MSCs增殖力均明显升高(t=4.167~12.100,均P<0.05);与1.0′10-9 mol/L组(3.295±0.346)及对照组(16.315±0.474)比较,1.0′10-7 mol/L利拉鲁肽组(1.380±0.255)HUC-MSCs
作者:徐向进;赵爱国;陈频;邵珠林;黄丽虹
来源:中华糖尿病杂志 2017 年 9卷 1期