目的:探讨小窝蛋白1(Cav1)对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响。方法:通过慢病毒载体构建Cav1沉默的小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞株和小鼠原代胰岛(Cav1-shRNA组),以空载体病毒组作为对照组(Ctrl-shRNA),并设空白对照组,各组均分别加入脱脂牛血清白蛋白和棕榈酸(0.5 mmol/L)处理24 h及48 h,通过四甲基偶氮唑蓝比色法及Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞活性及细胞凋亡,实时荧光定量PCR、Western blot检测凋亡相关的mRNA及蛋白表达水平。结果采用
t检验和单因素方差分析法进行统计学分析。
结果:与对照组比较,棕榈酸处理组的细胞存活率显著下降(0.89±0.10比0.24±0.04,
t=13.49,
P<0.01),P18、P19的mRNA和蛋白表达均上调(1.00±0.09比1.30±0.04、1.00±0.04比1.37±0.13,
t=5.28、4.71,均
P<0.05;0.87±0.04比1.48±0.05、1.02±0.06比1.41±0.07,
t=16.50、7.33,均
P<0.01);含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-6、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平明显上调(1.00±0.04比1.57±0.08、1.01±0.15比1.57±0.20、1.02±0.19比1.57±0.09,
t=11.04、3.88、4.53,均
P<0.05),蛋白表达也明显
作者:刘坤莹;曾文;林硕;林楚文;彭航娅;李海成;曾龙驿
来源:中华糖尿病杂志 2020 年 12卷 4期