目的:探讨白细胞介素-1β(IL-1β)对胰岛β细胞中胰岛素原剪切的影响及作用机制。方法:将原代小鼠胰岛分为对照组(正常培养)和IL-1β处理组,将大鼠β细胞系INS-1细胞分为对照组、IL-1β处理组、15 μmol/L SKF9636处理组、15 μmol/L SKF96365+IL-1β处理组、1 μmol/L Go6976处理组、1 μmol/L Go6976+IL-1β处理组、10 μmol/L U0126处理组、10 μmol/L U0126+IL-1β处理组、30 μmol/L磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)通路抑制剂LY294002处理组、30 μmol/L LY294002+IL-1β处理组、2 μmol/L核因子-κB(NF-κB)通路抑制剂BAY117082处理组、2 μmol/L BAY117082+IL-1β处理组。每组设置3个平行组。通过酶联免疫吸附试验法检测胰岛素原和总胰岛素浓度,并以胰岛素原与总胰岛素的比值来评价胰岛β细胞中胰岛素原的剪切水平。通过实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting法检测IL-1β处理后胰岛素原剪切关键酶激素原转化酶(PC)1/3、PC2蛋白及其编码基因
Pcsk1和
Pcsk2的表达。对IL-1β作用的信号通路进行筛选检测,通过qPCR和Western blotting法确定IL-1β调控
Pcsk1和
Pcsk2表达的信号通路。两组间比较采用独立样本
t检验,多组间比较采用单因素方差分析。
结
作者:温媛媛;史会连;黄凯玥;覃元;程昱淅;张伟;袁栎;陈园园
来源:中华糖尿病杂志 2023 年 15卷 9期