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目的 探讨应用小干扰RNA(siRNA)敲除突变K-ras基因对肺癌细胞H441体内外生长的抑制作用.方法 构建真核表达载体pSilencer3.1-K-rasV12,转染H441细胞后应用半定量RT-PCR及Western blotting检测突变K-ras基因mRNA及蛋白质的表达变化,噻唑蓝法检测H441细胞增殖速度的变化,流式细胞仪检测H441细胞凋亡率的变化.裸鼠皮下移植pSilencer3.1-K-rasV12处理的H441细胞,观察其成瘤性的改变.结果 测序证实pSilencer3.1-K-rasV12真核表达载体构建成功.RT-PCR灰度比值结果示空载体组、阴性对照组、实验组K-ras mRNA相对表达量分别为:93.7
作者：张志平；姜冠潮；杨帆；周足力；王俊
来源：中华外科杂志 2007 年 45卷 18期
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