目的 探讨谷氨酰胺抑制人外周血单个核细胞(PBMCs)细胞因子表达的分子机制.方法 Ficoll密度梯度离心法提取健康志愿者新鲜PBMCs,将分离得到的细胞分为两部分.第一部分细胞分为六部分,分别用不同浓度的Gln(0、8、15 mmol/L)预处理0.5 h及2.0 h后,再用10 g/L内毒素刺激4.0 h,留取细胞及上清.第二部分细胞分为A、B、C三组,将热休克蛋白(HSP)阻断剂Quercetin(200 μmol/L)加入A组及B组中,作用0.5 h;再将谷氨酰胺8 mmol/L加入A组和C组中;1.0 h后在三组中均加入10 g/L内毒素刺激4.0 h,留取细胞及上清.酶联免疫吸附(ELISA)测定上清中PBMCs肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)的表达,免疫印迹(Western Blot)技术检测细胞内HSP70的表达情况.对指标检测结果进行统计学分析.结果 8 mmol/L及15 mmol/L谷氨酰胺预处理0.5 h后能够明显增加HSP70的表达(P<0.05),8 mmol/L谷氨酰胺预处理2.0 h后能明显增加HSP70的表达(P<0.05).同时TNF-α和IL-10表达受抑(P<0.05);使用HSP70阻断剂Quercetin后,HSP70表达量明显下降,同时TNF-α和IL-10表达增加(P<0.05).结论 谷氨酰胺抑制内毒素刺激下PBMCs细胞因子的表达与HSP70介导有关.
作者：王立明；潘莉雅；张峰；王新颖；黎介寿
来源：中华外科杂志 2009 年 47卷 20期
