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目的用1例有3种免疫球蛋白分泌的多发性骨髓瘤(MM)患者免疫球蛋白重链(IgH)基因标志探讨MM究竟是由几个克隆组成.方法患者血清蛋白电泳发现3个单克隆免疫球蛋白峰;RT-PCR采用IgH V 6个家族(VH1~VH6)正向引物,通用J区反向引物,IgH 恒区Cμ、Cδ、Cγ、Cα和Cε 5种特异性反向引物.采用不同的引物组合进行PCR.获得的免疫球蛋白重排基因经克隆后,进行测序分析.结果患者用VH3家族引物和通用J区引物获得一条边缘清晰的浓染条带,表明患者骨髓瘤细胞是由Ig VH3片段组成可变区.用Ig VH3和恒区Cμ、Cγ、Cα特异性引物也可获得相应的PCR产物条带,但是不能用引物VH1、VH2、VH4、VH5 和J以及VH3和Cδ、Cε获得,表明患者有IgM、IgG、IgA基因重排,因此外周血血清有相应免疫球蛋白产物.克隆用Cμ、Cγ、Cα引物获得的PCR产物并扩增,然后测序比较,3种产物除恒区片段不同外,其重链基因的VH-J重排序列完全一致.表明该MM患者血清出现的3种免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的可变区是完全一致的.结论尽管从蛋白角度分析该MM细胞似乎是寡克隆性的,但是基因序列分析的结果表明其恶性克隆仍然是单克隆性起源.#

作者:朱平;刘继华;林宁晶;周建中;张新;董玉君;张野坪;岑溪南;马明信;虞积仁

来源:中华血液学杂志 2001 年 22卷 11期

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朱平;刘继华;林宁晶;周建中;张新;董玉君;张野坪;岑溪南;马明信;虞积仁
来源:
中华血液学杂志 2001 年 22卷 11期
标签:
多发性骨髓瘤 克隆起源 免疫球蛋白基因重排 序列分析
目的用1例有3种免疫球蛋白分泌的多发性骨髓瘤(MM)患者免疫球蛋白重链(IgH)基因标志探讨MM究竟是由几个克隆组成.方法患者血清蛋白电泳发现3个单克隆免疫球蛋白峰;RT-PCR采用IgH V 6个家族(VH1~VH6)正向引物,通用J区反向引物,IgH 恒区Cμ、Cδ、Cγ、Cα和Cε 5种特异性反向引物.采用不同的引物组合进行PCR.获得的免疫球蛋白重排基因经克隆后,进行测序分析.结果患者用VH3家族引物和通用J区引物获得一条边缘清晰的浓染条带,表明患者骨髓瘤细胞是由Ig VH3片段组成可变区.用Ig VH3和恒区Cμ、Cγ、Cα特异性引物也可获得相应的PCR产物条带,但是不能用引物VH1、VH2、VH4、VH5 和J以及VH3和Cδ、Cε获得,表明患者有IgM、IgG、IgA基因重排,因此外周血血清有相应免疫球蛋白产物.克隆用Cμ、Cγ、Cα引物获得的PCR产物并扩增,然后测序比较,3种产物除恒区片段不同外,其重链基因的VH-J重排序列完全一致.表明该MM患者血清出现的3种免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的可变区是完全一致的.结论尽管从蛋白角度分析该MM细胞似乎是寡克隆性的,但是基因序列分析的结果表明其恶性克隆仍然是单克隆性起源.#