目的鉴定K562细胞中氯化血红素(hemin)诱导性表达基因.方法分别提取经hemin诱导培养的K562细胞(tester)和未加诱导剂培养的K562细胞(driver)mRNA,逆转录合成双链cDNA.采用抑制性消减杂交(SSH)技术构建正向消减cDNA文库.筛选出阳性克隆.PCR扩增阳性克隆插入片段.反向Northern点杂交确定hemin诱导后表达上调的cDNA片段并测序后与GenBank序列进行Blast同源性比较分析.结果发现 15个cDNA片段在hemin诱导后表达上调,其中大部分与GenBank中已知功能蛋白质的mRNA序列同源,包括珠蛋白epsilon 1 (globin ε1), 类谷胱甘肽巯基转移酶Omega (GSTTLp28),含硒蛋白X1(SEPX1),磷酸丙糖异构酶(TPI1),核糖体蛋白L7(RPL7), 核糖体蛋白S13(RPS13) ,铁蛋白轻链(ferritin L polypeptide), 珠蛋白gamma A(globin Aγ), RAD51同系物C(RAD51C), 铁蛋白重链(ferritin H polypeptide),X盒结合蛋白(XBP1).受hemin 诱导性表达的基因克隆中的部分cDNA片段则同源于GenBank中已登录的mRNA序列,但相应蛋白质的功能尚不清楚, 包括cDNA DKFZp434I116,假定蛋白HSPC014及NOL1R2蛋白质.结论 hemin主要诱导K562细胞红系分化、蛋白质合成及代谢相关基因表达,这些发现为hemin诱导造血祖细胞红系分化的差异基因表达及其进一步功能研究提供了综合性

作者：陈汉春；孟巧

来源：中华血液学杂志 2003 年 24卷 4期