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目的探讨转染血管内皮生长因子(VEGF)-C cDNA对急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞增殖、全反式维甲酸(ATRA)诱导分化及化疗药物介导的细胞凋亡作用的影响.方法采用脂质体法将重组表达载体(pcDNA3.1-VEGF-C)和pcDNA3.1转染NB4细胞建立稳定细胞株;采用MTT法及集落形成实验分析转染VEGF-C cDNA对NB4细胞增殖的影响;NB4/VEGF-C细胞经ATRA诱导后涂片经瑞特-姬姆萨染色作形态学分析,实时荧光定量PCR检测调控粒细胞分化基因C/EBPα相对表达水平,同时以流式细胞术检测细胞表面的CD11b表达量;Annexin V/PI双染流式细胞术检测NB4/VEGF-C细胞经鬼臼乙叉甙(Vp16)诱导的细胞凋亡;并以实时荧光定量PCR检测bcl-2基因相对表达水平,均以NB4/pcDNA3.1细胞为对照.结果成功转染获得稳定表达VEGF-C的细胞株NB4/VEGF-C,其增殖能力显著高于NB4/pcDNA3.1细胞;NB4/VEGF-C细胞对抗ATRA介导的早幼粒细胞分化成熟,CD11b表达量低于对照组,C/EBPα基因含量仅为对照组的1/32;NB4/VEGF-C细胞经Vp16介导后bcl-2基因表达约为NB4/pcDNA3.1细胞的2.28倍,而凋亡的NB4/VEGF-C细胞百分率(7.20±2.52)

作者:丁凯阳;白霞;戴兰;董宁征;阮长耿

来源:中华血液学杂志 2006 年 27卷 4期

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作者:
丁凯阳;白霞;戴兰;董宁征;阮长耿
来源:
中华血液学杂志 2006 年 27卷 4期
标签:
血管内皮生长因子 细胞系,NB4 细胞增殖 细胞分化 细胞凋亡
目的探讨转染血管内皮生长因子(VEGF)-C cDNA对急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞增殖、全反式维甲酸(ATRA)诱导分化及化疗药物介导的细胞凋亡作用的影响.方法采用脂质体法将重组表达载体(pcDNA3.1-VEGF-C)和pcDNA3.1转染NB4细胞建立稳定细胞株;采用MTT法及集落形成实验分析转染VEGF-C cDNA对NB4细胞增殖的影响;NB4/VEGF-C细胞经ATRA诱导后涂片经瑞特-姬姆萨染色作形态学分析,实时荧光定量PCR检测调控粒细胞分化基因C/EBPα相对表达水平,同时以流式细胞术检测细胞表面的CD11b表达量;Annexin V/PI双染流式细胞术检测NB4/VEGF-C细胞经鬼臼乙叉甙(Vp16)诱导的细胞凋亡;并以实时荧光定量PCR检测bcl-2基因相对表达水平,均以NB4/pcDNA3.1细胞为对照.结果成功转染获得稳定表达VEGF-C的细胞株NB4/VEGF-C,其增殖能力显著高于NB4/pcDNA3.1细胞;NB4/VEGF-C细胞对抗ATRA介导的早幼粒细胞分化成熟,CD11b表达量低于对照组,C/EBPα基因含量仅为对照组的1/32;NB4/VEGF-C细胞经Vp16介导后bcl-2基因表达约为NB4/pcDNA3.1细胞的2.28倍,而凋亡的NB4/VEGF-C细胞百分率(7.20±2.52)