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目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用.方法用流式细胞术检测hTERT ASODN转染HL-60细胞72 h后细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA梯带;将转染及未转染寡核苷酸的HL-60细胞分别接种BALB/c裸鼠,观察成瘤情况,切片观察移植瘤组织形态;另取10只BALB/c裸鼠,改进成瘤方法使其均匀成瘤后分成两组,在瘤体局部分别注射ASODN、磷酸盐缓冲液(PBS),经7 d治疗后测量瘤体并切片观察其细胞形态变化,采用TUNEL方法检测细胞凋亡.结果hTERT ASODN作用于HL-60细胞72 h后,流式细胞术检测出早期凋亡峰,琼脂糖凝胶电泳显示DNA梯形条带,SODN组及空白对照组未检测出凋亡峰及DNA梯形条带.ASODN转染的HL-60细胞组BALB/c裸鼠接种后第16~17天成瘤,5只中2只成瘤,未转染组在第12~13天成瘤,5只中4只成瘤,成瘤后ASODN治疗组瘤组织间质及血管较少,PBS治疗对照组瘤组织间质发达,血管丰富.成瘤后ASODN治疗前肿瘤体积为(100.9±24.6)mm3,治疗后肿瘤与PBS对照组比较,生长明显减缓[瘤体积分别为(422.7±326.4)mm3和(786.4±357.6)mm3](P<0.05).组织切片显示,ASODN治疗组瘤组织中可见大量细胞呈现凋亡形态,PBS治疗组则少见凋亡细胞.TUNEL检测显示,ASODN治疗组瘤组织中阳性细

作者:孙玲;王峰;孙慧;乐晓萍;葛秀峰;刘林湘;张钦宪

来源:中华血液学杂志 2006 年 27卷 6期

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作者:
孙玲;王峰;孙慧;乐晓萍;葛秀峰;刘林湘;张钦宪
来源:
中华血液学杂志 2006 年 27卷 6期
标签:
细胞系,HL-60 基因,hTERT 寡核苷酸类,反义 细胞凋亡 小鼠,BALB/c
目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用.方法用流式细胞术检测hTERT ASODN转染HL-60细胞72 h后细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA梯带;将转染及未转染寡核苷酸的HL-60细胞分别接种BALB/c裸鼠,观察成瘤情况,切片观察移植瘤组织形态;另取10只BALB/c裸鼠,改进成瘤方法使其均匀成瘤后分成两组,在瘤体局部分别注射ASODN、磷酸盐缓冲液(PBS),经7 d治疗后测量瘤体并切片观察其细胞形态变化,采用TUNEL方法检测细胞凋亡.结果hTERT ASODN作用于HL-60细胞72 h后,流式细胞术检测出早期凋亡峰,琼脂糖凝胶电泳显示DNA梯形条带,SODN组及空白对照组未检测出凋亡峰及DNA梯形条带.ASODN转染的HL-60细胞组BALB/c裸鼠接种后第16~17天成瘤,5只中2只成瘤,未转染组在第12~13天成瘤,5只中4只成瘤,成瘤后ASODN治疗组瘤组织间质及血管较少,PBS治疗对照组瘤组织间质发达,血管丰富.成瘤后ASODN治疗前肿瘤体积为(100.9±24.6)mm3,治疗后肿瘤与PBS对照组比较,生长明显减缓[瘤体积分别为(422.7±326.4)mm3和(786.4±357.6)mm3](P<0.05).组织切片显示,ASODN治疗组瘤组织中可见大量细胞呈现凋亡形态,PBS治疗组则少见凋亡细胞.TUNEL检测显示,ASODN治疗组瘤组织中阳性细