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目的 研究生长抑制因子4(ING4)基因表达对K562细胞增殖的影响.方法 将经过定点突变技术人源化改造的ING4(鼠→人)生长抑制因子4基因酶切并连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,然后与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hING4,将它转染QBI-293A细胞后收获重组腺病毒Ad-hING4(以下简称为Ad-ING4).将Ad-ING4感染K562细胞,光学显微镜下观察病毒感染前后细胞形态的变化,免疫细胞化学分析凋亡因子的改变,激光扫描共聚焦显微镜观察K562细胞的凋亡,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率.结果 成功构建了人ING4腺病毒质粒,获得高滴度的重组腺病毒Ad-ING4,用它感染K562细胞72 h后,FCM法测定细胞凋亡率为19.7

作者:郁心;张海峰;王金志;谢宇锋;杨吉成;缪竞诚

来源:中华血液学杂志 2007 年 28卷 6期

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作者:
郁心;张海峰;王金志;谢宇锋;杨吉成;缪竞诚
来源:
中华血液学杂志 2007 年 28卷 6期
标签:
基因,ING4 细胞系,K562 细胞凋亡
目的 研究生长抑制因子4(ING4)基因表达对K562细胞增殖的影响.方法 将经过定点突变技术人源化改造的ING4(鼠→人)生长抑制因子4基因酶切并连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,然后与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hING4,将它转染QBI-293A细胞后收获重组腺病毒Ad-hING4(以下简称为Ad-ING4).将Ad-ING4感染K562细胞,光学显微镜下观察病毒感染前后细胞形态的变化,免疫细胞化学分析凋亡因子的改变,激光扫描共聚焦显微镜观察K562细胞的凋亡,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率.结果 成功构建了人ING4腺病毒质粒,获得高滴度的重组腺病毒Ad-ING4,用它感染K562细胞72 h后,FCM法测定细胞凋亡率为19.7