目的 探讨慢性髓性白血病细胞系K562细胞甲基化诱导静止基因(TMS1)甲基化程度及三氧化二砷(As2O3)对其甲基化状态的逆转作用及其机制.方法 K562细胞经不同浓度As2O3处理48 h,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测As2O3处理前后K562细胞TMS1基因甲基化程度;RT-PCR及Western blot法检测As2O3处理前后K562细胞TMS1 mRNA及蛋白表达,Western blot法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化;用细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V/PI)标记、流式细胞术检测细胞凋亡.结果 K562细胞TMS1基因呈完全甲基化,TMS1 mRNA及蛋白呈低表达状态,相对表达水平分别为0.01±0.01、0.09±0.02;2 μtmol/L As2O3可完全逆转K562细胞TMS1的甲基化水平,TMSl mRNA及蛋白相对表达水平分别为0.72±0.04和1.3±0.06,与处理前相比明显升高(P＜0.01);细胞凋亡检测结果显示,与对照组相比,2 μmol/L As2O3处理组细胞凋亡率明显增加[(2.05±0.16)％对(12.24±1.06)％,P＜0.05)].与对照组相比,2μmol/L As2O3处理组K562细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达明显增高,Bcl-2/Bax比值明显降低(1.94±0.14对0.56±0.12,P＜0.01).结论 As2O3可通过逆转抑癌基因TMS1的甲基化状态,恢复其表达,并通过下调Bcl-2/Bax比值促进K562细胞凋亡.

作者：李洪丽；董小锋；王焱；徐文伟；董琳；毕可红；朱传升

来源：中华血液学杂志 2014 年 35卷 3期