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目的 研究转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)在慢性髓性白血病(CML)患者中的表达情况及其作用机制.方法 收集50例CML患者(慢性期33例,加速期7例,急变期10例)骨髓标本和20名正常对照者外周血标本,用RT-PCR方法检测C/EBPα基因mRNA的表达情况及其与bcr-abl融合基因的相关性;观察伊马替尼对K562细胞C/EBPα基因mRNA表达的影响;采用慢病毒转染的方法将重组pLVX-C/EBPα-3FLAG-Puro及空载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro慢病毒质粒转入K562细胞,构建稳定表达C/EBPα的K562细胞株;用CCK-8试剂盒检测细胞增殖;RT-PCR方法检测Foxo3a、Bim基因的表达情况.结果 与正常对照者相比,CML患者C/EBPα mRNA表达显著下降(P<0.01),并与bcr-abl融合基因表达呈负相关(r=-0.505,P<0.01);RT-PCR和Western blot检测结果显示成功构建稳定表达C/EBPα的K562细胞株;K562-C/EBPα细胞增殖水平明显低于未处理K562细胞及K562-空载体细胞;K562-C/EBPα细胞Foxo3a、Bim基因mRNA相对表达量分别为1.06±0.06、0.53±0.07,均高于K562-空载体和K562细胞(P<0.01,P<0.05).结论 CML患者转录因子C/EBPα表达水平下调,过表达C/EBPα对K562细胞增殖有抑制作用.

作者:张贵丽;董菲;栾材富;张霞;邵会媛;刘杰;孙成铭

来源:中华血液学杂志 2015 年 36卷 11期

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作者:
张贵丽;董菲;栾材富;张霞;邵会媛;刘杰;孙成铭
来源:
中华血液学杂志 2015 年 36卷 11期
标签:
白血病,髓系,慢性,BCR-ABL阳性 CCAAT增强子结合蛋白α K562细胞 细胞增殖 Leukemia,myelogenous,chronic,BCR-ABL positive CCAAT-enhancer-binding protein-alpha K562 cell Cell growth
目的 研究转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)在慢性髓性白血病(CML)患者中的表达情况及其作用机制.方法 收集50例CML患者(慢性期33例,加速期7例,急变期10例)骨髓标本和20名正常对照者外周血标本,用RT-PCR方法检测C/EBPα基因mRNA的表达情况及其与bcr-abl融合基因的相关性;观察伊马替尼对K562细胞C/EBPα基因mRNA表达的影响;采用慢病毒转染的方法将重组pLVX-C/EBPα-3FLAG-Puro及空载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro慢病毒质粒转入K562细胞,构建稳定表达C/EBPα的K562细胞株;用CCK-8试剂盒检测细胞增殖;RT-PCR方法检测Foxo3a、Bim基因的表达情况.结果 与正常对照者相比,CML患者C/EBPα mRNA表达显著下降(P<0.01),并与bcr-abl融合基因表达呈负相关(r=-0.505,P<0.01);RT-PCR和Western blot检测结果显示成功构建稳定表达C/EBPα的K562细胞株;K562-C/EBPα细胞增殖水平明显低于未处理K562细胞及K562-空载体细胞;K562-C/EBPα细胞Foxo3a、Bim基因mRNA相对表达量分别为1.06±0.06、0.53±0.07,均高于K562-空载体和K562细胞(P<0.01,P<0.05).结论 CML患者转录因子C/EBPα表达水平下调,过表达C/EBPα对K562细胞增殖有抑制作用.