目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)细胞miRNA-196b-5p和miRNA-99a-5p表达与自噬和凋亡的关系.方法 以人MM细胞株U266细胞及45例MM患者瘤细胞为研究对象,以40例健康体检者为对照,采用实时定量PCR法测定细胞中miRNA-196b-5p和miRNA-99a-5p表达水平,采用Western blot法测定自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、P62、Beclin-1)、凋亡相关分子(CL caspase3、CL caspase7、Bcl-2、Bax)和TGF-β/Smad通路相关蛋白(TGF-β1、Smad2/3、p-Smad3、Smad7)表达水平,采用流式细胞术测定细胞凋亡率,分析miRNA表达水平与MM患者临床特征的相关性.结果 ①与正常浆细胞比较,U266细胞、MM患者瘤细胞的miRNA-196b-5p表达显著增加(0.43±0.15对2.44±0.63、2.02±0.85,P值均< 0.001),miRNA-99a-5p表达显著降低(1.87±0.61对0.62±0.15、0.80±0.33,P值均<0.001),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、Bcl-2表达显著增加,P62、Bax、CL caspase3、CL caspase7表达显著降低,细胞凋亡率降低(P值均< 0.05).②正常CD138+浆细胞分别转染miRNA-196b-5pmimic或miRNA-99a-5pinhibitor 48h后,与未转染对照组比较,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、TGF-β1、p-Smad3表达显著增高,P62、Smad7表达显著降低,细胞凋亡率减少(P值均<0.05);上述反应体系加入自噬抑制剂3-甲基腺
作者:尚晋;陈志忠;王志红;魏天南;吴文冰;陈为民
来源:中华血液学杂志 2018 年 39卷 9期