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目的观察体外培养的牛眼虹膜色素上皮(iris pigment epithelium,IPE)细胞是否具有与视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞相似的特异性吞噬视网膜感光细胞外节(retinal outer segment,ROS)的功能.方法采用Hu方法分离和培养新生牛眼IPE细胞.以鼠抗细胞角蛋白抗体和鼠抗S100抗体为一抗,采用免疫组织化学染色对培养的IPE细胞进行鉴定.Trizol一步法提取生长近融合的传2代IPE细胞的总RNA.根据Genbank中牛巨噬细胞甘露糖受体的相关系基因列设计特异引物,对其mRNA的表达进行逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain-reaction,RT-PCR)检测.结果培养获得的IPE细胞无其它细胞污染,提取的IPE细胞总RNA完整,无降解.RT-PCR检测结果显示,体外培养牛眼IPE细胞可表达甘露糖受体的mRNA.结论体外培养的IPE细胞可表达甘露糖受体的mRNA,有可能具有与RPE细胞相似的特异性ROS吞噬功能.

作者:李毅斌;孙葆忱

来源:中华眼底病杂志 2002 年 18卷 1期

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作者:
李毅斌;孙葆忱
来源:
中华眼底病杂志 2002 年 18卷 1期
标签:
色素上皮,眼 虹膜 甘露糖受体 逆转录聚合酶链反应 细胞培养
目的观察体外培养的牛眼虹膜色素上皮(iris pigment epithelium,IPE)细胞是否具有与视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞相似的特异性吞噬视网膜感光细胞外节(retinal outer segment,ROS)的功能.方法采用Hu方法分离和培养新生牛眼IPE细胞.以鼠抗细胞角蛋白抗体和鼠抗S100抗体为一抗,采用免疫组织化学染色对培养的IPE细胞进行鉴定.Trizol一步法提取生长近融合的传2代IPE细胞的总RNA.根据Genbank中牛巨噬细胞甘露糖受体的相关系基因列设计特异引物,对其mRNA的表达进行逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain-reaction,RT-PCR)检测.结果培养获得的IPE细胞无其它细胞污染,提取的IPE细胞总RNA完整,无降解.RT-PCR检测结果显示,体外培养牛眼IPE细胞可表达甘露糖受体的mRNA.结论体外培养的IPE细胞可表达甘露糖受体的mRNA,有可能具有与RPE细胞相似的特异性ROS吞噬功能.