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目的观察外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对可见光诱导培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响. 方法以(2 000±500) lx白色荧光灯照射培养的人RPE细胞,利用荧光素标记的连接素V/碘化丙锭(annexin V-fluorescein isothiocyanate/ propidium iodium,Annexin V-FITC/PI)双染色流式细胞测定、细胞免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptional polymerase chain reaction,RT-PCR)、酶联免疫测定等方法,检测加入不同浓度的bFGF后,培养的RPE细胞的凋亡及细胞内bFGF、成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)基因及半胱天冬酶-3(caspase-3)的变化. 结果 (1)分别加入外源性bFGF 10 、20 ng/ml时, RPE细胞凋亡比单纯光照组明显减少(P<0.05);(2)加入bFGF 10 ng/ml组的bcl-2蛋白表达比单纯光照组明显增加(P<0.01),而与无光照组之间差异无显著性意义(P>0.05);(3)光照后bcl-2 mRNA表达比无光照组下降,但随着加入bFGF浓度的增高, bcl-2 mRNA表达又逐渐增加,当加入bFGF 20 ng/ml时,bcl-2 mRNA的表达与无光照组之间差异无显著性意义(P>0.05)

作者:周咏东;严密;张军军

来源:中华眼底病杂志 2003 年 19卷 1期

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周咏东;严密;张军军
来源:
中华眼底病杂志 2003 年 19卷 1期
标签:
成纤维细胞生长因子,碱性 色素上皮,眼 细胞死亡 Caspase类
目的观察外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对可见光诱导培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响. 方法以(2 000±500) lx白色荧光灯照射培养的人RPE细胞,利用荧光素标记的连接素V/碘化丙锭(annexin V-fluorescein isothiocyanate/ propidium iodium,Annexin V-FITC/PI)双染色流式细胞测定、细胞免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptional polymerase chain reaction,RT-PCR)、酶联免疫测定等方法,检测加入不同浓度的bFGF后,培养的RPE细胞的凋亡及细胞内bFGF、成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)基因及半胱天冬酶-3(caspase-3)的变化. 结果 (1)分别加入外源性bFGF 10 、20 ng/ml时, RPE细胞凋亡比单纯光照组明显减少(P<0.05);(2)加入bFGF 10 ng/ml组的bcl-2蛋白表达比单纯光照组明显增加(P<0.01),而与无光照组之间差异无显著性意义(P>0.05);(3)光照后bcl-2 mRNA表达比无光照组下降,但随着加入bFGF浓度的增高, bcl-2 mRNA表达又逐渐增加,当加入bFGF 20 ng/ml时,bcl-2 mRNA的表达与无光照组之间差异无显著性意义(P>0.05)