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目的 观察N-甲基-N亚硝酸脲(MNU)诱导的大鼠视网膜损伤过程中凋亡相关分子半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、bel-2相关X蛋白(bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-xl(bcl-xl)在视网膜中的时空表达,探讨其在MNU诱导的视网膜损伤中的作用. 方法将鼠龄50 d的30只SPF级雌性SD大鼠随机分为MNU模型组(24只大鼠)和正常对照组(6只大鼠).模型组按40 mg/kg的剂量腹腔注射MNU建立MNU模型;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水5ml/kg.模型组大鼠根据MNU注射后不同处死时间再分为1、3、7、10 d组,每小组各6只大鼠.正常对照组大鼠注射后3 d处死.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组视网膜中caspase-3、bax和bel-xl的基因表达情况;免疫荧光技术检测其在视网膜中的表达以及分布的变化,并用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导dUTP缺口末段标记(TUNEL)法检测视网膜细胞凋亡的变化. 结果 经病理学检测确定造模成功.RT-PCR检测结果表明,[与正常对照组相比(caspase-3和bax的相对吸光度(RA)值为62.45±7.65、46.53±4.41],MNU模型1 d组caspase-3(83.23±8.11,P=0.009)和bax(72.73±9.46,P=0.004)的表达均增强,3 d组二者表达水平均最高(caspase-3 RA=140.48±18.40,P=0.000;bax RA=102.36±13.97,P=0.001),10 d组caspase-3的表达水平(RA=47.32±5.37,P=

作者:高杨;邓新国;孙倩娜;何梅凤;钟志强

来源:中华眼底病杂志 2009 年 25卷 2期

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作者:
高杨;邓新国;孙倩娜;何梅凤;钟志强
来源:
中华眼底病杂志 2009 年 25卷 2期
标签:
半胱氨酸内肽酶类 bcl-2相关X蛋白质 bcl-X蛋白质 细胞凋亡 动物实验 Cysteine endopeptidases bcl-2-associated X protein bcl-X protein Apoptosis Animal experimentation
目的 观察N-甲基-N亚硝酸脲(MNU)诱导的大鼠视网膜损伤过程中凋亡相关分子半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、bel-2相关X蛋白(bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-xl(bcl-xl)在视网膜中的时空表达,探讨其在MNU诱导的视网膜损伤中的作用. 方法将鼠龄50 d的30只SPF级雌性SD大鼠随机分为MNU模型组(24只大鼠)和正常对照组(6只大鼠).模型组按40 mg/kg的剂量腹腔注射MNU建立MNU模型;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水5ml/kg.模型组大鼠根据MNU注射后不同处死时间再分为1、3、7、10 d组,每小组各6只大鼠.正常对照组大鼠注射后3 d处死.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组视网膜中caspase-3、bax和bel-xl的基因表达情况;免疫荧光技术检测其在视网膜中的表达以及分布的变化,并用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导dUTP缺口末段标记(TUNEL)法检测视网膜细胞凋亡的变化. 结果 经病理学检测确定造模成功.RT-PCR检测结果表明,[与正常对照组相比(caspase-3和bax的相对吸光度(RA)值为62.45±7.65、46.53±4.41],MNU模型1 d组caspase-3(83.23±8.11,P=0.009)和bax(72.73±9.46,P=0.004)的表达均增强,3 d组二者表达水平均最高(caspase-3 RA=140.48±18.40,P=0.000;bax RA=102.36±13.97,P=0.001),10 d组caspase-3的表达水平(RA=47.32±5.37,P=