目的 观察细胞周期依赖性蛋白激酶5(Cdk5)抑制剂Roscovtine对皇家外科学院(RCS)大鼠视网膜光感受器细胞凋亡的影响.方法 RCS雄性大鼠30只,随机数字表法随机分为早期干预组、中期干预组、晚期干预组,每组10只.分别于出生后17、25、35 d,给予右眼玻璃体腔注射Cdk5抑制剂Roscovitine 4μl作为实验眼;左眼玻璃体腔注射Roscovitine溶剂二甲基亚砜4μl作为对照眼.早期干预组、中期干预组、晚期干预组大鼠分别于出生后25、35、45 d处死,摘除眼球作视网膜切片,采用苏木精-伊红(HE)染色观察视网膜外核层厚度变化;采用免疫组织化学染色观察Cdk5、p25及活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (cleave-caspase 3)的阳性表达;采用原位末端标记法(TUNEL)检测视网膜凋亡细胞的表达.取视网膜组织,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠视网膜中Cdk5、p25及cleave-caspase 3的蛋白表达.对Cdk5、p25、cleave-caspase 3阳性表达与凋亡细胞表达两两变量之间行多变量偏相关分析.结果 早期干预组、中期干预组大鼠实验眼外核层厚度均较对照眼厚,且早期干预组实验眼与对照眼外核层 厚度的差异更明显.晚期干预组大鼠实验眼与对照眼的外核层厚度差异不明显.免疫组织化学染色结果显示,早期干预组、中期干预组实验眼外核层Cdk5、p25、cle
作者:任英华;邹刚;张金金;盛迅伦
来源:中华眼底病杂志 2015 年 31卷 3期