目的探讨替德肝素(tedelparin)在抑制冷冻后的人视网膜色素上皮(human retina pigment epithelium, hRPE)细胞分泌肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor,HGF)和生长中的作用.方法体外培养的RPE细胞在-80℃下进行冷冻,冷冻时间分为0、15和60 s, 随后继续体外培养(体外实验组)和注入正常兔眼玻璃体(体内实验组)并在第6天时取出一些兔眼的玻璃体液加入到正常RPE细胞培养液中孵育48 h;每实验组再分为两个亚组:替德肝素治疗(终浓度25 μl/ml)组和未治疗组,在3 d、6 d时收集细胞培养上清和玻璃体样本,ELISA法测定HGF含量,MTT法测定48 h后RPE细胞的增殖状态.结果在体外实验组,比较未冷冻组,冷冻后的RPE细胞随着冷冻时间延长HGF分泌水平增加(F=27.36, P<0.01),替德肝素干预组HGF分泌水平下降(F=179.50,P<0.01).在体内实验组(兔玻璃体)随着冷冻时间延长HGF浓度较对照组明显增高(F=6.24, P<0.01),当玻璃体液(冷冻15 s和60 s, 第6天)加入到正常RPE细胞培养液48 h后刺激细胞增殖(P<0.01),在替德肝素干预组,细胞增殖明显减弱(F=44.90,P<0.05).结论冷冻可刺激RPE细胞在体外和体内玻璃体环境中HGF的高分泌,且随着冷冻时间增加更为显著.替德肝素可降低冷冻后RPE细胞分泌HGF水平和抑制促生长环境中的RPE细胞生长
作者:王方;宋正宇;陶晓锋;顾青;许迅
来源:中华眼科杂志 2005 年 41卷 2期