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目的 探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对绿脓杆菌脂多糖(LPS)诱导的人角膜基质细胞核因子κB(NF-κB)活化与细胞因子释放的干预作用及其机制.方法 为实验研究.原代培养人眼角膜基质细胞(HCFs),选取生长良好的传代HCFs分为对照组、LPS刺激组及PDTC预处理组.LPS组给予单纯LPS刺激,PDTC预处理组则在LPS刺激前先加PDTC培养30 min,再给予相同浓度的LPS.在LPS刺激1、2、4及8 h时,分别收集各组细胞和上清液,Western blot检测HCFs NF-κB的活化表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HCFs培养上清液中白细胞介素6(IL-6)和IL-8的分泌情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HCFs IL-6和IL-8 mRNA的表达.结果 与对照组相比较,LPS刺激后,HCFs胞核NF-κB p65的表达明显升高,HCFs中IL-6与IL-8蛋白的分泌和mRNA的表达均显著升高.PDTC预处理30 min后再给予LPS刺激,可部分抑制HCFs胞核中NF-κB p65的活化表达(tl h=9.3766,t2 h=15.9011,t4 h=12.5851,t8 h=10.8346;均P<0.01);PDTC预处理可不同程度的下调LPS诱导的HCFs分泌IL-6、IL-8蛋白及IL-6、IL-8 mRNA的表达,二者均明显低于同时间点LPS组HCFs的表达,差异均有统计学意义(IL-6蛋白:t1 h=7.9154,t2 h=10.8630,t4 h=8.2451,t8 h=13.5063;IL-8蛋白:t1h=8.5663,t2 h=20.5169,t4 h=2

作者:陈国玲;吴欣怡

来源:中华眼科杂志 2008 年 44卷 1期

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作者:
陈国玲;吴欣怡
来源:
中华眼科杂志 2008 年 44卷 1期
标签:
角膜基质 硫代氨基甲酸酯类 吡咯烷类 NF-κB 细胞因子类 Corneal stroma Thiocarbamates Pyrrolidines NF kappa B Cytokines
目的 探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对绿脓杆菌脂多糖(LPS)诱导的人角膜基质细胞核因子κB(NF-κB)活化与细胞因子释放的干预作用及其机制.方法 为实验研究.原代培养人眼角膜基质细胞(HCFs),选取生长良好的传代HCFs分为对照组、LPS刺激组及PDTC预处理组.LPS组给予单纯LPS刺激,PDTC预处理组则在LPS刺激前先加PDTC培养30 min,再给予相同浓度的LPS.在LPS刺激1、2、4及8 h时,分别收集各组细胞和上清液,Western blot检测HCFs NF-κB的活化表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HCFs培养上清液中白细胞介素6(IL-6)和IL-8的分泌情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HCFs IL-6和IL-8 mRNA的表达.结果 与对照组相比较,LPS刺激后,HCFs胞核NF-κB p65的表达明显升高,HCFs中IL-6与IL-8蛋白的分泌和mRNA的表达均显著升高.PDTC预处理30 min后再给予LPS刺激,可部分抑制HCFs胞核中NF-κB p65的活化表达(tl h=9.3766,t2 h=15.9011,t4 h=12.5851,t8 h=10.8346;均P<0.01);PDTC预处理可不同程度的下调LPS诱导的HCFs分泌IL-6、IL-8蛋白及IL-6、IL-8 mRNA的表达,二者均明显低于同时间点LPS组HCFs的表达,差异均有统计学意义(IL-6蛋白:t1 h=7.9154,t2 h=10.8630,t4 h=8.2451,t8 h=13.5063;IL-8蛋白:t1h=8.5663,t2 h=20.5169,t4 h=2