目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)小干扰RNA(siRNA)表达质粒体外转染人晶状体上皮细胞LEC-B3对其增殖的影响,为防治晶状体后囊膜混浊(PCO)的临床研究提供思路.方法 实验研究.以永生化的人晶状体上皮细胞LEC-B3为研究对象,首先用针对αB-晶状体蛋白的免疫组织化学方法鉴定LEC-B3细胞来源.在此基础上,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测LEC-B3细胞中bFGF及其受体1(FGFR1)的mRNA表达.然后,构建bFGF siRNA表达质粒及其对照质粒,并在体外稳定转染LEC-B3细胞,干扰其bFGF基因表达,再用实时定量PCR和Western blot法检测转染后LEC-B3细胞中bFGF基因和蛋白表达,并以流式细胞术检测LEC-B3细胞中细胞增殖核抗原(PCNA)表达.将bFGF siRNA表达质粒及其对照质粒转染后LEC-B3细胞中PCNA表达水平分别设为实验组和对照组,用成组设计的t检验比较两组PCNA表达差异.结果 bFGF和FGFR1的mRNA在LEC-B3细胞中均有表达;bFGF siRNA表达质粒稳定转染LEC-B3细胞后,其bFGF基因和蛋白表达降低,实验组PCNA表达明显降低,和对照组相比差异具有统计学意义(t=-5.0011,P=0.0005).结论 LEC-B3细胞组成性表达bFGF和FGFR1的mRNA;干扰bFGF基因表达可有效抑制LEC-B3细胞增殖.
作者：徐庆；贾仁兵
来源：中华眼科杂志 2008 年 44卷 12期
