目的 研究外源性视锥视杆细胞同源盒(CRX)基因是否能够诱导体外培养的视网膜Müller细胞源性干细胞向光感受器细胞定向分化.方法 实验研究.体外培养、扩增出生5～7 d昆明小鼠视网膜Müller细胞,通过无血清培养去分化为干细胞.采用免疫细胞化学法分别鉴定Müller细胞(GS和Vimentin)和干细胞(Nestin和Sox2)标志物的表达.取第2代祖细胞分为3个组:空白对照组、空载体组[采用只含绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒转染细胞]、CRX组(用含GFP+CRX基因的慢病毒转染细胞).诱导分化7 d后,采用q-PCR、免疫印迹法检测光感受器细胞标志CRX蛋白、视紫红质(Rhodopsin)、感光蛋白S-opsin的表达差异.组间均数的两两比较采用独立样本t检验.结果体外培养的Müller细胞96.03％±1.21％同时表达GS和Vimentin标志物,去分化后表达干细胞标志物Nestin和Sox2.CRX诱导分化7 d,CRX和Rhodopsin表达均明显增加,部分细胞发生神经元样改变.CRX组、空载体组及空白对照组CRX mRNA相对表达量分别为10.830±2.301、1.214±0.469、1.000±0.576,CRX组与空白对照组相比,差异有统计学意义(t=1.57,P=0.02),空载体组与空白对照组相比,差异无统计学意义(t=0.29,P=0.84).CRX组、空载体组及空白对照组Rhodopsin mRNA相对表达量分别为26.410±16.180、1.3

作者：姬红培；高照林；熊宇；姚飞；宋伟涛；张恩东；周蓉蓉；夏晓波

来源：中华眼科杂志 2018 年 54卷 12期