目的:制备出具备生物学活性的羊膜粉并探索其保存条件,探讨该羊膜粉制成的羊膜-纤维蛋白胶泥(AM-FS)对兔重度眼表碱烧伤模型的疗效。方法:实验研究。取新鲜羊膜风干后液氮冷却研磨成颗粒直径<260 μm的羊膜粉并进行灭菌。检测该羊膜粉制备后及不同温度[室温(25℃)、4 ℃、-20 ℃]下保存10、20、30 d后转化生长因子β(TGF-β)、神经生长因子受体(NGFR)、肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF)及碱性成纤维生长因子(bFGF)的表达,并与新鲜羊膜进行比较。倍比稀释制备0.125~65 mg/ml共10种羊膜粉浓度及不含羊膜粉的AM-FS,将兔角膜上皮细胞(CEC)置于其中培养72 h,选取波长450 nm处的吸光度(
A)值最大者,以其羊膜粉浓度进行后续动物实验。将32只兔(32只右眼)制作重度眼表碱烧伤模型,采用随机数表法分为AM-FS组、新鲜羊膜移植组、纤维蛋白胶(FS)组及抗生素对照组每组8只兔(8只眼),给予不同眼表干预手段,之后每周观察角膜修复情况,第28 d取材行HE染色观察角膜组织,并行免疫组织化学染色观察单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。对生长因子或受体的表达差异倍数进行对数处理后得到的logFC值并用BH法校正;采用
t检验及方差分析对数据
作者:李楠钰;张文佳;胡竹林
来源:中华眼科杂志 2022 年 58卷 8期