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目的应用特异性siRNA(小干涉RNA)抑制慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因表达,观察其对K562细胞生物学特性的影响.方法以慢性粒细胞白血病细胞系K562为研究对象,合成并转染针对K562细胞bcr-abl融合基因融合位点的21nt siRNA,应用Western blot法检测bcr-abl融合基因的表达;3H-TdR掺入法检测K562细胞的增殖活性;Annexin Ⅴ-FITC/PI染色法检测K562细胞的存活状况;流式细胞仪法检测K562细胞周期变化以及联苯胺染色法检测K562细胞的分化状况;应用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-xL/Bax的表达.结果 (1)RNA干涉组K562细胞bcr-abl融合基因的表达水平明显下降;(2)RNA干涉组的CPM值(每分钟脉冲数)在siRNA转染K562细胞第24 h, 48 h, 72 h和96 h均明显低于对照组(下降率依次为33.06

作者:王莎;柴玉波;刘飞;张孝勇;贾卫;谢鑫;于文强;尚振川;金伯泉;孙秉中

来源:中华医学杂志 2005 年 85卷 3期

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作者:
王莎;柴玉波;刘飞;张孝勇;贾卫;谢鑫;于文强;尚振川;金伯泉;孙秉中
来源:
中华医学杂志 2005 年 85卷 3期
标签:
白血病,髓样,慢性 基因融合 K562细胞系
目的应用特异性siRNA(小干涉RNA)抑制慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因表达,观察其对K562细胞生物学特性的影响.方法以慢性粒细胞白血病细胞系K562为研究对象,合成并转染针对K562细胞bcr-abl融合基因融合位点的21nt siRNA,应用Western blot法检测bcr-abl融合基因的表达;3H-TdR掺入法检测K562细胞的增殖活性;Annexin Ⅴ-FITC/PI染色法检测K562细胞的存活状况;流式细胞仪法检测K562细胞周期变化以及联苯胺染色法检测K562细胞的分化状况;应用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-xL/Bax的表达.结果 (1)RNA干涉组K562细胞bcr-abl融合基因的表达水平明显下降;(2)RNA干涉组的CPM值(每分钟脉冲数)在siRNA转染K562细胞第24 h, 48 h, 72 h和96 h均明显低于对照组(下降率依次为33.06