目的研究人类表皮生长因子受体-2(Her-2/neu)小分子干扰RNA(siRNA)对Her-2/neu过表达的肺腺癌细胞的细胞周期和凋亡机制的影响.方法用化学合成的靶向Her-2/neu siRNA转染肺腺癌calu-3细胞,转染前后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞中Her-2/neu、细胞周期蛋白(Cyclin)D1 mRNA水平;流式细胞术检测Her-2/neu蛋白水平和细胞周期的变化;AnnexinⅤ异硫氢酸荧光素(FITC)试剂盒检测肺癌细胞的凋亡情况;荧光分光光度法测定Caspase-3活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)水平.结果 Her-2/neu siRNA能在mRNA和蛋白水平下调肺癌细胞株calu-3中Her-2/neu基因的表达.calu-3细胞转染Her-2/neu siRNA 48 h后处于G0/G1期的细胞增多,同时S期的细胞比例减少,与未转染对照组、空载体组和非特异性siRNA组比较差异有统计学意义(F=6.1,P<0.01).转染Her-2/neu siRNA后Cyclin D1 mRNA水平下降,同时培养上清液中的VEGF含量为176 pg/ml±6 pg/ml(F=24.7,P<0.01),Caspase-3活性为135
作者：任淑华；王井伟；张林
来源：中华医学杂志 2005 年 85卷 22期
