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目的探讨蛋白酶体功能缺陷是否能诱导多巴胺能细胞发生凋亡及其可能的作用机理.方法应用高选择性的蛋白酶体抑制剂lactacystin(0、1 μmol/L、5 μmol/l或10 μmol/L)处理大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞株24 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力的改变.10 μmol/L lactacystin作用24 h后,Hoechst荧光染色观察凋亡细胞的核形态学改变,流式细胞仪测定细胞凋亡百分率.用Western印迹法检测10 μmol/L lactacystin作用0、24或48 h时PC12细胞内半胱氨酸蛋白水解酶3活化片段的动态变化.结果 5 μmol/L 或10 μmol/L lactacystin作用24 h后,PC12细胞的活力(87

作者:杨卉;陈生弟;陆国强;李彪;梁梁;徐洁懿

来源:中华医学杂志 2005 年 85卷 29期

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作者:
杨卉;陈生弟;陆国强;李彪;梁梁;徐洁懿
来源:
中华医学杂志 2005 年 85卷 29期
标签:
蛋白酶抑制药 PC12 细胞 脱噬作用 帕金森病
目的探讨蛋白酶体功能缺陷是否能诱导多巴胺能细胞发生凋亡及其可能的作用机理.方法应用高选择性的蛋白酶体抑制剂lactacystin(0、1 μmol/L、5 μmol/l或10 μmol/L)处理大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞株24 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力的改变.10 μmol/L lactacystin作用24 h后,Hoechst荧光染色观察凋亡细胞的核形态学改变,流式细胞仪测定细胞凋亡百分率.用Western印迹法检测10 μmol/L lactacystin作用0、24或48 h时PC12细胞内半胱氨酸蛋白水解酶3活化片段的动态变化.结果 5 μmol/L 或10 μmol/L lactacystin作用24 h后,PC12细胞的活力(87