目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导时间对骨髓基质细胞(BMSC)体外成软骨分化,及构建组织工程化软骨的影响.方法 将体外培养扩增的第二代猪BMSC按5.0×107个/ml的密度接种于聚羟基乙酸(PGA)制成的圆柱形支架材料上,第5天开始应用含TGF-β1(10μg/L)、IGF-Ⅰ(50μg/L)和地塞米松(40μg/L)的软骨诱导液培养.按TGF-β1诱导时间的不同分为A(诱导2周)、B(诱导4周)、C(诱导6周)、D(诱导8周)和E(诱导10周)5组.体外培养10周后取材行大体观察、组织学和组织化学检测、聚合蛋白多糖(GAG)定量分析和生物力学测定,同时利用Western印迹和免疫组织化学进行Ⅱ型胶原表达的分析.结果 随诱导时间延长,软骨陷窝由周边开始逐渐向内部增多,排列渐趋均匀,蛋白聚糖等软骨特异性基质成分积聚.免疫组化染色及Western印迹结果均显示Ⅱ型胶原含量随诱导时间延长逐渐递增.这种情况至诱导6周后逐渐稳定,诱导6周和诱导10周间差异无统计学意义.诱导6周以上组弹性模量和抗压强度均明显高于A、B两组.结论 利用BMSC作为种子细胞构建组织工程化软骨,诱导持续时间与形成的软骨质量相关,6周的诱导时间基本可以形成具有良好组织结构、化学组成和力学性质的软骨组织.
作者：刘天一；周广东；魏娴；武晓莉；陈付国；崔磊；刘伟；曹谊林
来源：中华医学杂志 2007 年 87卷 31期
