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目的 建立双重实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测尿液DD3/PSA mRNA比值,评价其初步应用.方法 分别在前列腺特异性抗原(PSA)基因外显子1和2、差异显示编码3(DD3)基因外显子1和3之间设计一对引物和一条探针,PSA和DD3基因的TaqMan-MGB探针5'分别标记HEX和FAM荧光素,建立双重实时荧光RT-PCR检测尿液DD3/PSA mRNA比值的方法,并对方法学进行评价.对34例前列腺癌(Pca)、44例良性前列腺增生(BPH)患者前列腺按摩后尿液中的DD3/PSA mRNA比值进行检测,评价其临床应用价值.结果 扩增产物经测序证明为PSA和DD3特异性片段.以LNCaP细胞cDNA作模板,PSA mRNA和DD3 mRNA最低检测限分别为0.6细胞/反应和60细胞/反应.DD3/PSA mRNA比值批内、批间变异系数分别为3.8
作者：陈凤萍；陈俐丽；沈默；陈伟；陶志华；吴秀玲；胡元平；李澄棣；陈占国；陈晓东
来源：中华医学杂志 2008 年 88卷 4期
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