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目的 探讨基质金属蛋白酶9( MMP-9)对皮肤成纤维细胞增殖、凋亡及合成Ⅰ、Ⅲ型前胶原的影响.方法通过0.1、1.0μg/n1脂多糖(LPS)刺激大鼠皮肤成纤维细胞18、48 h建立MMP-9高表达模型;通过RNA干扰(RNAi)技术抑制模型MMP-9的表达.分别观察MMP-9高表达模型和RNAi技术抑制MMP-9表达后成纤维细胞增殖、凋亡和合成Ⅰ、Ⅲ型前胶原的改变.活细胞计数试剂盒(CCK)8检测细胞增殖;流式细胞技术检测细胞凋亡;实时定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达.结果 1.0 μg/ml LPS干预成纤维细胞48 h,MMP-9表达明显高于对照组,mRNA表达量为对照组的14.25倍,蛋白表达量为对照组的2.31倍(均P<0.05).MMP-9高表达模型在抑制MMP-9高表达后MMP-9 mRNA表达量为模型对照组的1/8,蛋白表达量为模型对照组的1/3(均P<0.05).MMP-9表达增高伴有皮肤成纤维细胞增殖减慢[(1.08±0.08)比(1.18±0.09),P<0.05],抑制MMP-9高表达后细胞增殖明显改善[(1.78±0.17)比 (1.53±0.15),P<0.01].MMP-9高表达后成纤维细胞凋亡比例与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),抑制MMP-9高表达后48 h细胞凋亡比例(3.53%±0.22%)低于模型对照组(4.47%±0.46%,P=0.033).MMP-9高表达及抑制高表达后对成纤维细胞Ⅰ型胶原合成均无明显影响(

作者:林刁珠;杨川;陈黎红;任萌;朱平;薛声能;严励

来源:中华医学杂志 2012 年 92卷 8期

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作者:
林刁珠;杨川;陈黎红;任萌;朱平;薛声能;严励
来源:
中华医学杂志 2012 年 92卷 8期
标签:
基质金属蛋白酶9 成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 前胶原合成 Matrix metalloproteinase 9 Fibroblasts Cell proliferation Apoptosis Procollagen synthesis
目的 探讨基质金属蛋白酶9( MMP-9)对皮肤成纤维细胞增殖、凋亡及合成Ⅰ、Ⅲ型前胶原的影响.方法通过0.1、1.0μg/n1脂多糖(LPS)刺激大鼠皮肤成纤维细胞18、48 h建立MMP-9高表达模型;通过RNA干扰(RNAi)技术抑制模型MMP-9的表达.分别观察MMP-9高表达模型和RNAi技术抑制MMP-9表达后成纤维细胞增殖、凋亡和合成Ⅰ、Ⅲ型前胶原的改变.活细胞计数试剂盒(CCK)8检测细胞增殖;流式细胞技术检测细胞凋亡;实时定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达.结果 1.0 μg/ml LPS干预成纤维细胞48 h,MMP-9表达明显高于对照组,mRNA表达量为对照组的14.25倍,蛋白表达量为对照组的2.31倍(均P<0.05).MMP-9高表达模型在抑制MMP-9高表达后MMP-9 mRNA表达量为模型对照组的1/8,蛋白表达量为模型对照组的1/3(均P<0.05).MMP-9表达增高伴有皮肤成纤维细胞增殖减慢[(1.08±0.08)比(1.18±0.09),P<0.05],抑制MMP-9高表达后细胞增殖明显改善[(1.78±0.17)比 (1.53±0.15),P<0.01].MMP-9高表达后成纤维细胞凋亡比例与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),抑制MMP-9高表达后48 h细胞凋亡比例(3.53%±0.22%)低于模型对照组(4.47%±0.46%,P=0.033).MMP-9高表达及抑制高表达后对成纤维细胞Ⅰ型胶原合成均无明显影响(