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目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠肺微血管内皮细胞表达白细胞介素17受体C (IL-17RC)的影响及甲泼尼龙的干预作用.方法 体外培养肺微血管内皮细胞,根据TNF-α刺激浓度和时间的差异,将肺微血管内皮细胞分为TNF-α量效组和时效组:前者以0、0.1、1、10 μg/LTNF-α与肺微血管内皮细胞孵育3h;后者以10 μg/L TNF-α分别与肺微血管内皮细胞孵育0、1、3、6、12 h.药物干预:分别以10 μg/L的TNF-α和200 μg/L甲泼尼龙+10μg/L的TNF-α与肺微血管内皮细胞孵育3h.用反转录-PCR,Western印迹及免疫细胞化学染色法检测IL-17RC表达.反转录-PCR检测TNF-α和甲泼尼龙对肺微血管内皮细胞表达IL-17RC mRNA的影响.结果 反转录-PCR和Western印迹均证实肺微血管内皮细胞表达IL-17RC,免疫细胞化学染色发现IL-17RC主要分布在肺微血管内皮细胞胞膜和胞质.量效组IL-17RC mRNA相对表达量随TNF-α浓度(0、0.1、1、10 μg/L)增加逐渐升高,分别为:0.241±0.010和0.372±0.017、0.452±0.017、0.643±0.042(F=46.460,P<0.05).时效组IL-17RC mRNA相对表达量于1h开始上升(0.417±0.038),3h达峰值(0.674±0.018),之后渐下降(6 h:0.378 ±0.035,12 h:0.318 ±0.032),但均高于孵育0h组(0.197 ±0.008),各时相组间比较差异均有统计学

作者:尤青海;张丹;孙耕耘;岳扬;王楠

来源:中华医学杂志 2013 年 93卷 2期

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作者:
尤青海;张丹;孙耕耘;岳扬;王楠
来源:
中华医学杂志 2013 年 93卷 2期
标签:
肿瘤坏死因子α 受体,白细胞介素17 内皮细胞 大鼠 Tumor necrosis factor-alpha Receptor,interleukin-17 Endothelial cells Rat
目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠肺微血管内皮细胞表达白细胞介素17受体C (IL-17RC)的影响及甲泼尼龙的干预作用.方法 体外培养肺微血管内皮细胞,根据TNF-α刺激浓度和时间的差异,将肺微血管内皮细胞分为TNF-α量效组和时效组:前者以0、0.1、1、10 μg/LTNF-α与肺微血管内皮细胞孵育3h;后者以10 μg/L TNF-α分别与肺微血管内皮细胞孵育0、1、3、6、12 h.药物干预:分别以10 μg/L的TNF-α和200 μg/L甲泼尼龙+10μg/L的TNF-α与肺微血管内皮细胞孵育3h.用反转录-PCR,Western印迹及免疫细胞化学染色法检测IL-17RC表达.反转录-PCR检测TNF-α和甲泼尼龙对肺微血管内皮细胞表达IL-17RC mRNA的影响.结果 反转录-PCR和Western印迹均证实肺微血管内皮细胞表达IL-17RC,免疫细胞化学染色发现IL-17RC主要分布在肺微血管内皮细胞胞膜和胞质.量效组IL-17RC mRNA相对表达量随TNF-α浓度(0、0.1、1、10 μg/L)增加逐渐升高,分别为:0.241±0.010和0.372±0.017、0.452±0.017、0.643±0.042(F=46.460,P<0.05).时效组IL-17RC mRNA相对表达量于1h开始上升(0.417±0.038),3h达峰值(0.674±0.018),之后渐下降(6 h:0.378 ±0.035,12 h:0.318 ±0.032),但均高于孵育0h组(0.197 ±0.008),各时相组间比较差异均有统计学