目的 观察体外坏死股骨头骨组织对犬骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖分化的影响.方法 用液氮冷冻法制作犬股骨头坏死模型,采用分离液分离法结合贴壁法获取犬BMSC,利用Transwell培养板将BMSC与不同骨组织共培养,依据培养条件不同分3组,空白组:10％胎牛血清+DMEM培养基,对照组:10％胎牛血清+DMEM培养基+正常股骨头骨组织,实验组:10％胎牛血清+DMEM培养基+坏死股骨头骨组织.观察细胞生长状况,采用噻唑蓝(MTT)比色法测各组细胞相对数,作细胞内碱性磷酸酶染色并检测培养液上清中碱性磷酸酶浓度,茜素红染色、油红O染色分别观察钙结节、脂滴的形成.结果 对照组与实验组BMSC增殖率高于空白组,在1、3、5d差异有统计学意义(P＜0.05),实验组增殖率在5、7d时大于对照组(P＜0.05)；7d时细胞内碱性磷酸酶染色示对照组与实验组均为阳性,第7、9天培养液上清中碱性磷酸酶浓度按以下顺序依次减小,对照组＞实验组＞空白组(20.4±1.2) U/L比(60.5 ±4.5) U/L,P＜0.05.21 d时茜素红染色示各组均有钙结节形成,数量按以下顺序依次减小,对照组＞实验组＞空白组,21 d时油红O染色示各组均未见有脂滴形成.结论 正常与坏死股骨头骨组织对BMSC增殖均有促进作用,并且均可诱导BMSC向成骨细胞分化而未向脂肪细胞分化,坏死股骨头骨组织对BMSC增
作者：王萌；廖琦；周斌；仇志强；程立明
来源：中华医学杂志 2013 年 93卷 11期
