目的 探讨采用灌注式生物反应器和可控微结构支架促进人胚成骨细胞在大体积支架内均匀扩增的可行性和优势.方法 设计灌注式生物反应器,制备大体积可控微结构磷酸三钙支架.将人胚成骨细胞与支架复合后分别行静态培养或灌注培养4、8、16 d.利用D-葡萄糖日消耗量、细胞活力(MTT法)检测,和组织学切片观察、扫描电子显微镜(SEM)观察及X射线能谱(EDX)分析,研究细胞在支架内的扩增、分布及功能情况.结果 葡萄糖日耗量随培养时间延长而升高(F=96.81,P＜0.05),灌注培养组显著高于静态培养组(F=1848.91,P＜0.05)；细胞活力随培养时间延长而升高(F=125.67,P＜0.05),灌注培养组显著高于静态培养组(F=1588.15,P＜0.05).组织学切片及SEM观察均显示静态培养组细胞仅在支架边缘存活,而灌注培养组细胞在遍及支架内部的管道内均有良好增殖,并形成层状的新生组织.EDX分析证实细胞间的类球体基质为磷酸钙结节.结论 灌注培养结合可控微结构支架实现了人胚成骨细胞在大体积支架内的均匀扩增,可控微结构支架可作为深入研究载体内液流调配和细胞行为的有效工具,人胚成骨细胞可作为体外构建大体积骨移植物的种子细胞.
作者：王林；马真胜；李涤尘；雷伟；胡蕴玉；王臻；李祥；张扬；裴国献
来源：中华医学杂志 2013 年 93卷 25期
