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目的:探讨高糖环境下脂联素对人足细胞内质网应激凋亡途径及细胞骨架的影响及其机制。方法人条件永生足细胞分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组、高糖+脂联素组,实时定量PCR法检测内质网应激分子糖调节蛋白78( GPR78)、C/EBP同源蛋白( CHOP )及caspase 12 mRNA的表达,Western印迹法检测其蛋白的表达,流式细胞仪检测足细胞凋亡;实时定量PCR法检测细胞骨架蛋白desmin、瞬时受体电势C(TRPC)6 mRNA的表达,Western印迹法检测其蛋白的表达,免疫荧光染色法检测足细胞骨架的变化。结果(1)流式细胞仪检测到高糖组足细胞凋亡率显著高于其他3组(26.15%±1.38%比2.39%±0.58%、4.84%±0.87%、16.71%±1.15%,均P<0.05),同时内质网应激经典分子GPR78、CHOP 及caspase 12 mRNA及蛋白的表达均显著上调(均 P <0.05);高糖+脂联素组足细胞凋亡率较高糖组低10%,差异有统计学意义( P<0.05),且GPR78、CHOP及caspase 12 mRNA及蛋白水平均低于高糖组(均P<0.05)。(2)在高糖环境下,细胞骨架蛋白desmin、TRPC6 mRNA及蛋白表达均较正常组高(均 P <0.05),而脂联素干预可抑制 desmin、TRPC6高表达( P<0.05)。同时免疫荧光法检测可见高糖刺激可导致足细胞骨架蛋白微丝肌动蛋

作者:王艳红;田继华;郭海秀;米洋;李佳明;李荣山

来源:中华医学杂志 2014 年 14期

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作者:
王艳红;田继华;郭海秀;米洋;李佳明;李荣山
来源:
中华医学杂志 2014 年 14期
标签:
足细胞 葡萄糖 内质网 细胞凋亡 细胞骨架 Podocytes Glucose Endoplasmic reticulum Apoptosis Cytoskeleton
目的:探讨高糖环境下脂联素对人足细胞内质网应激凋亡途径及细胞骨架的影响及其机制。方法人条件永生足细胞分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组、高糖+脂联素组,实时定量PCR法检测内质网应激分子糖调节蛋白78( GPR78)、C/EBP同源蛋白( CHOP )及caspase 12 mRNA的表达,Western印迹法检测其蛋白的表达,流式细胞仪检测足细胞凋亡;实时定量PCR法检测细胞骨架蛋白desmin、瞬时受体电势C(TRPC)6 mRNA的表达,Western印迹法检测其蛋白的表达,免疫荧光染色法检测足细胞骨架的变化。结果(1)流式细胞仪检测到高糖组足细胞凋亡率显著高于其他3组(26.15%±1.38%比2.39%±0.58%、4.84%±0.87%、16.71%±1.15%,均P<0.05),同时内质网应激经典分子GPR78、CHOP 及caspase 12 mRNA及蛋白的表达均显著上调(均 P <0.05);高糖+脂联素组足细胞凋亡率较高糖组低10%,差异有统计学意义( P<0.05),且GPR78、CHOP及caspase 12 mRNA及蛋白水平均低于高糖组(均P<0.05)。(2)在高糖环境下,细胞骨架蛋白desmin、TRPC6 mRNA及蛋白表达均较正常组高(均 P <0.05),而脂联素干预可抑制 desmin、TRPC6高表达( P<0.05)。同时免疫荧光法检测可见高糖刺激可导致足细胞骨架蛋白微丝肌动蛋