目的 研究抗衰老Klotho蛋白在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移、黏附能力中的作用及对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 采用不同浓度的Klotho蛋白(0.1、1、10 nmol/L)处理HUVEC24h,同时设置空白对照组、阳性对照VEGF组(10 nmol/L)和AKT信号通路抑制组(10 nmol/L Klotho蛋白+AKT抑制剂).通过MTT方法、划痕实验、Transwell方法、细胞黏附实验分别检测Klotho蛋白对HUVEC细胞的增殖、迁移、黏附能力的影响;并通过蛋白印迹(Westernblot)检测Klotho蛋白对HUVEC中VEGF表达的诱导作用.结果 MTT方法检测0.1、1、10 nmol/LKlotho蛋白组A值与空白对照组(0.59±0.03)相比,分别增加0.63±0.03、0.71±0.04、0.80±0.04,差异有统计学意义(F=9.32,P<0.05);划痕实验0.1、1、10 nmol/L Klotho蛋白组细胞迁移率与空白对照组(9.40 ±2.07)%相比,分别增加(12.28±0.62)%、(31.66±1.50)%、(36.69 ±0.79)%,差异有统计学意义(F=9.50,P<0.05);Transwell方法发现与空白对照组细胞迁移数(80.13±12.19)相比,0.1、1、10 nmol/L Klotho蛋白组增加95.88±9.54、143.13 ±7.83、178±12.77,差异有统计学意义(F=11.51,P<0.05);细胞黏附实验0.1、1、10 nmol/L Klotho蛋白组和空白对照组细胞的黏附数分别为59.60±5.13
作者:王芳娟;胡巨龙;熊力;陈文;赵晓辉
来源:中华医学杂志 2014 年 94卷 28期