目的：探讨特异性磷脂酰肌醇蛋白多糖3（ GPC-3）小发夹RNA （ shRNA ）转染对高转移潜能肝癌细胞增殖和肝癌生长的抑制作用。方法将构建与筛选GPC-3 shRNA最有效序列转染MHCC-97H细胞，以荧光定量聚合酶链反应（ PCR）或Western印迹分析mRNA或蛋白表达；以5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷（ EdU）、划痕和Transwell试验评估肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力；以Caspase-Glo?3/7荧光法分析细胞凋亡；以裸鼠移植瘤观察对肝癌形成与生长的影响，免疫组化分析瘤组织GPC-3、β-环连蛋白（catenin）、p-GSK3β及细胞周期蛋白（cyclin）D1表达。结果 shRNA1质粒转染MHCC-97H细胞效率＞80％， GPC-3mRNA下降75.6％（t＝15.473， P＜0.001），蛋白表达受抑；细胞增殖抑制71.1％（t＝10.468，P＜0.001）、迁移抑制80.1％（t＝32.697，P＜0.001）与侵袭抑制69.1％（t＝39.647，P＜0.001）；β-catenin mRNA抑制67.7％（t＝18.4，P＜0.001）；Gli1 mRNA上调53.3％（t＝-4.824，P＝0.008）；干预组裸鼠肿瘤形成平均11.2 d，显著长于阴性组5.5 d和空白组5.3 d （P＜0.001），瘤体积65.5 mm3明显小于空白组404.8 mm3和阴性组365.7 mm3（P＜0.001）；且瘤组织GPC-3、β-catenin、p-GSK3β及cyclinD1等信号分子表达显著下调（ P

作者：姚敏；王理；时运；钱琦；蔚丹丹；时杨；陆少林；姚登福

来源：中华医学杂志 2014 年 32期