目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)修饰的间充质干细胞(MSCs)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和血管狭窄的影响.方法 培养应用MSCs与VSMCs,Lv-CGRP-EGFP转染MSCs,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测MSCs中CGRP的表达.MSCs与VSMCs共培养后,实验分为MSCsCGRP+/++ VSMCs组、MSCsCGRP-/-+ VSMCs和MSCsPBS+VSMCs组,应用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(MTT)法检测VSMCs增殖能力.构建大鼠颈动脉球囊损伤模型,携带慢病毒的MSCs移植动物模型中,细胞移植后7d,Western印迹法检测血管中CGRP表达,免疫荧光染色检测损伤血管CD31的表达;细胞移植后28 d,苏木精-伊红染色法(H-E染色)检测损伤血管新生内膜/中膜面积;免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 病毒转染后48 h,与PBS组比较,CGRP修饰的MSCs中CGRP的mRNA(0.135±0.049比25.306±0.110)和蛋白水平(1.953±0.039比19.483±0.421)均增高(均P＜0.05).细胞共培养后24、48、72、96 h,MTT染色显示,与MSCsPBS+ VSMCs组比较,MSCsCGRP+/++ VSMCs组中VSMCs的增殖活性明显减弱[24 h(0.54±0.06比0.44±0.06),48 h(0.69 ±0.11比0.54±0.07),72 h(0.87±0.08比0.70 ±0.11),96 h(1.42±0.28比1.10±0.24)均P＜0.05].体内研究显示:

作者：石蓓；陈攀科；龙仙萍；赵然尊；邓文文

来源：中华医学杂志 2015 年 95卷 20期